Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 14 trang
Dung lượng: Đang cập nhật

Giới thiệu nội dung

Structural and Mutational Analyses of Protein-Protein Interactions Between Transthyretin and Retinol-Binding Protein

Tác giả: Giuseppe Zanotti, Claudia Folli, Laura Cendron, Beatrice Alfieri, Sonia K. Nishida, Francesca Gliubich, Nicola Pasquato, Alessandro Negro and Rodolfo Berni

Lĩnh vực: Khoa học Hóa học, Sinh hóa học, Y học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này báo cáo cấu trúc tinh thể của một phức hợp đại phân tử, trong đó transthyretin người, holo-retinol-binding protein người và kháng thể Fab kháng retinol-binding protein của chuột được lắp ráp với tỉ lệ mol 1:2:2. Các tương tác chính, cả phân cực và không phân cực, giữa retinol-binding protein và transthyretin liên quan đến nhóm hydroxyl của retinol và một số lượng hạn chế các amino acid tiếp xúc với dung môi. Vai trò của các amino acid trong transthyretin đối với sự hình thành phức hợp với retinol-binding protein đã được xem xét bằng phân tích đột biến. Các hậu quả cấu trúc của một số đột biến điểm trên transthyretin ảnh hưởng đến sự nhận biết protein-protein cũng đã được điều tra. Mặc dù có một vài ngoại lệ, nhìn chung, sự thay thế một chuỗi bên ưa nước bằng một chuỗi kỵ nước trong các vùng tiếp xúc dẫn đến giảm hoặc thậm chí mất ái lực liên kết, do đó bộc lộ tầm quan trọng của tương tác kỵ nước bề mặt và mức độ bổ sung cao giữa retinol-binding protein và transthyretin.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả
    • Cấu trúc của một phức hợp giữa TTR người, holoRBP người và kháng thể Fab kháng RBP
    • Phân tích đột biến các yếu tố xác định sự liên kết RBP của TTR
    • Biến thể V20S TTR
    • Các biến thể TTR 184S và 184A
    • Biến thể S85A TTR
    • Các biến thể D99A và S100E TTR
    • Các biến thể Y114F và Y114H TTR
    • Mô hình hóa các tương tác của TTR và RBP cá đối với các protein tương ứng trong phức hợp TTR-RBP-Fab
  • Thảo luận
  • Quy trình thực nghiệm
    • Vật liệu
    • Đột biến định hướng theo vị trí, biểu hiện vi khuẩn và tinh sạch các biến thể TTR người
    • Xác định trình tự amino acid của các miền biến đổi Fab kháng RBP
    • Xét nghiệm liên kết cho tương tác giữa holoRBP và các biến thể TTR
    • Kết tinh, thu thập dữ liệu, xác định cấu trúc và tinh chỉnh cho phức hợp TTR-RBP-Fab và các biến thể V20S và Y114 TTR
  • Tài liệu tham khảo