Báo cáo khoa học: Staphylococcus aureus protein A binding to von Willebrand factor A1 domain is mediated by conserved IgG binding regions

Staphylococcus aureus protein A binding to von Willebrand factor A1 domain is mediated by conserved IgG binding regions

Tác giả: Maghnus O’Seaghdha, Carina J. van Schooten, Steven W. Kerrigan, Jonas Emsley, Gregg J. Silverman, Dermot Cox, Peter J. Lenting, and Timothy J. Foster

Lĩnh vực: Microbiology, Thrombosis and Haemostasis, Clinical Pharmacology, Pharmacy, Rheumatic Disease

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này phân tích cơ chế tương tác giữa protein A (Spa) của Staphylococcus aureus và yếu tố von Willebrand (vWF). Protein A, một protein bề mặt của S. aureus, nổi tiếng với khả năng liên kết với vùng Fc của IgG. Nghiên cứu này cho thấy Spa cũng liên kết mạnh mẽ với vùng Fab của các immunoglobulin mang chuỗi nặng VH3 và yếu tố von Willebrand (vWF). Tương tác protein A-vWF được chứng minh là quan trọng trong sự bám dính của S. aureus vào tiểu cầu dưới điều kiện ứng suất cắt. Nghiên cứu chỉ ra rằng biểu hiện Spa là đủ để vi khuẩn bám dính vào vWF bất động trong điều kiện lưu lượng thấp. Các vùng liên kết trên vWF, cụ thể là các miền D’-D3 và A1, với ái lực liên kết khác nhau đã được xác định. Miền A1 của vWF có ái lực liên kết cao với protein A, trong khi miền D’-D3 có ái lực thấp hơn. Cụ thể hơn, các vùng liên kết trên vWF nhận biết một vùng trên xoắn 1 và 2 của protein A, vùng này chồng lấn với vị trí liên kết Fc của IgG. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng tất cả năm miền liên kết IgG của protein A đều có khả năng liên kết với vWF.

Mục lục chi tiết: (Trích xuất tự động từ file gốc)

• Abstract
• Keywords
• Correspondence
• Introduction
• Results
• Perfusion studies
• Identification of regions within von Willebrand factor that bind to protein A
• Individual domains of protein A bind von Willebrand factor
• SpaD binding to vWF A1 is inhibited by IgG Fc regions but not a VH3-Fab
• Amino acid substitutions of SpaD
• Discussion
• Experimental procedures
• Bacterial strains and growth conditions
• DNA constructions
• Site-directed mutagenesis of a domain of spa
• Induction and purification of recombinant proteins
• Protein analysis and western ligand blotting assays
• Preparation of flow chamber slides
• Videomicoscopy
• Recombinant protein binding assay
• Inhibition studies
• Acknowledgements
• References