Báo cáo khoa học: Solution structure and stability of the full-length excisionase from bacteriophage HK022

Solution Structure and Stability of the Full-Length Excisionase from Bacteriophage HK022

Tác giả: Vladimir V. Rogov, Christian Lücke, Lucia Muresanu, Hans Wienk, Ioana Kleinhaus, Karla Werner, Frank Löhr, Primož Pristovšek, and Heinz Rüterjans

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này sử dụng phổ NMR cộng hưởng từ hạt nhân đa chiều để xác định cấu trúc không gian ba chiều và nghiên cứu độ bền của protein cắt bỏ (excisionase) từ thể thực khuẩn thể HK022. Một dạng đột biến của protein, Xis_C28S, đã được sử dụng để khắc phục vấn đề bất ổn định và độc tính cao của dạng tự nhiên. Các phân tích cấu trúc cho thấy protein có một lõi được sắp xếp chặt chẽ với các xoắn alpha và các sợi beta. Nghiên cứu cũng làm sáng tỏ sự khác biệt về cấu trúc so với protein tương tự từ thể thực khuẩn thể lambda, gợi ý một mô hình liên kết DNA kiểu ‘winged-helix’. Bên cạnh đó, độ bền nhiệt của protein cũng được đánh giá, cho thấy sự ổn định cao và tính thuận nghịch của quá trình biến tính. Phát hiện về sự bất thường trong liên kết isoaspartyl tại vị trí Asn66-Gly67 cũng được ghi nhận, một hiện tượng hiếm gặp ở protein vi khuẩn. Nghiên cứu này cung cấp cái nhìn sâu sắc về cấu trúc và cơ chế hoạt động của các protein excisionase, quan trọng cho việc hiểu rõ hơn về quá trình tái tổ hợp gen.