Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 12 trang
Dung lượng: Đang cập nhật

Giới thiệu nội dung

Purification of phosphoproteins by immobilized metal affinity chromatography and its application to phosphoproteome analysis

Tác giả: Mitsuyo Machida, Hidetaka Kosako, Kyoko Shirakabe, Michimoto Kobayashi, Masato Ushiyama, Junichi Inagawa, Joe Hirano, Tomoyo Nakano, Yasuhiko Bando, Eisuke Nishida and Seisuke Hattori

Lĩnh vực: Proteomics, Biochemistry, Molecular Biology

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc tối ưu hóa quy trình sắc ký ái lực kim loại hóa (IMAC) để làm giàu phosphoprotein nhằm phân tích phosphoproteome. Các điều kiện tối ưu cho IMAC đã được xác định, bao gồm việc sử dụng ion Ga(III) làm kim loại gắn ái lực, pH 5.5 và nồng độ NaCl 0.5 M. Phương pháp này đã chứng minh hiệu quả trong việc làm giàu các phosphoprotein như ERK, RSK và Akt, với tỷ lệ phục hồi cao. Kết quả cho thấy việc làm giàu phosphoprotein bằng IMAC giúp phát hiện các protein có độ phong phú thấp và giảm số lượng các đốm protein trên gel điện di hai chiều (2-DE), từ đó hỗ trợ hiệu quả cho việc xác định các protein mục tiêu. Nghiên cứu cũng đã ứng dụng phương pháp này để xác định các chất nền tiềm năng của Akt, như Abelson interactor 1 (Abi-1). Quy trình này được đề xuất như một công cụ hữu ích và có thể áp dụng rộng rãi trong các phân tích phosphoproteome.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả
  • Bàn luận
  • Quy trình thực nghiệm
  • Tài liệu tham khảo