Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 194 KB

Giới thiệu nội dung

Purification and properties of an alkaline proteinase of Fusarium culmorum

Tác giả: Anja I. Pekkarinen, Berne L. Jones, Marja-Leena Niku-Paavola

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày quá trình tinh sạch và đặc tính hóa một enzyme proteinase kiềm được phân lập từ nấm Fusarium culmorum. Enzyme này được sản xuất khi nấm được nuôi cấy trong môi trường chứa protein ngũ cốc. Quá trình tinh sạch bao gồm sắc ký loại trừ kích thước và sắc ký trao đổi ion. Enzyme cho thấy hoạt tính tối ưu ở pH 8.3-9.6 và nhiệt độ 50°C, nhưng không ổn định ở các điều kiện này. Nó bị ức chế bởi phenylmethanesulfonyl fluoride và chymostatin, cho thấy nó là một serine proteinase. Phân tích trình tự amino acid cho thấy sự tương đồng cao với các subtilisin nấm khác, gợi ý rằng đây là một enzyme thuộc nhóm subtilisin. Nghiên cứu cũng thảo luận về vai trò tiềm năng của enzyme này trong bệnh Fusarium head blight (FHB) và các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính và độ ổn định của nó.

Mục lục chi tiết:

  • Purification and properties of an alkaline proteinase of Fusarium culmorum
  • Keywords: cereal; fungus; chymotrypsin; subtilisin; proteinase.
  • Introduction
  • Materials and Methods
  • Fusarium culture
  • Analytical methods
  • Nonspecific proteinase assay
  • Specific chymotrypsin/subtilisin-like activity assay
  • Protein assay
  • Purification of the enzyme
  • Characterization of the proteinase
  • Effects of pH and temperature on activity
  • Effects of pH and temperature on enzyme stability
  • Effects of class specific inhibitors on the enzyme
  • Effects of calcium on the activity and stability of the proteinase
  • Effect of added protein on the proteinase stability
  • Substrate specificity and kinetic constants for SAAPFpNA
  • The enzyme is a serine class proteinase
  • Amino-acid sequence studies
  • The hydrolytic specificity of the enzyme
  • Effect of the azogelatin concentration on the enzyme activity
  • General remarks
  • Conclusions
  • Acknowledgements
  • References