Báo cáo khoa học: Perturbation of folding and reassociation of lactate dehydrogenase by proline and trimethylamine oxide

Tác giả: Oscar P. Chilson and Anne E. Chilson

Lĩnh vực: Department of Biology, Washington University, St Louis, MO, USA

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá ảnh hưởng của các chất thẩm thấu (osmolytes) tương thích và đối kháng lên sự tái hoạt động của lactate dehydrogenase (LDH) từ hai trạng thái cấu hình khác nhau. Trái với dự đoán, proline và trimethylamine oxide (TMAO) đã ức chế cả tiến trình ban đầu và mức độ tái hoạt động của LDH từ tim bò sau khi bị biến tính bởi guanidine hydrochloride, cũng như sau khi bất hoạt ở pH 2.3. Việc tái hoạt hóa LDH từ tim lợn sau khi phân ly do axit cũng bị ức chế bởi cả proline và TMAO. Trong mọi trường hợp, TMAO là chất ức chế tái hoạt động hiệu quả hơn. Phân tích các đặc tính xúc tác của enzyme tái hoạt hóa cho thấy loài phân tử có hoạt tính xúc tác trong giai đoạn đầu của quá trình tái hoạt hóa LDH từ tim lợn bị bất hoạt bởi axit phản ánh một cấu hình không phải dạng tự nhiên.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Materials and methods
• Enzyme stock solutions
• Enzyme concentration
• Assay of enzymatic activity
• Denaturation and acid-induced dissociation
• Reactivation
• Molecular graphics analysis
• Results
• Effect of osmolytes on the reactivation of bovine LDH following denaturation in GdnHCl
• Perturbation of the reactivation of acid-dissociated LDH by proline and TMAO
• Discussion
• Acknowledgements
• References