Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật LAMP để chẩn đoán xác định nhiễm sán lá gan nhỏ Clonorchis sinensis trên người

Nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật LAMP để chẩn đoán xác định nhiễm sán lá gan nhỏ Clonorchis sinensis trên người

Tác giả: Hoàng Thị Hạnh

Lĩnh vực: Sinh học thực nghiệm

Nội dung tài liệu:

Luận văn này tập trung nghiên cứu và xây dựng quy trình kỹ thuật LAMP (Loop-Mediated Isothermal Amplification) nhằm mục đích chẩn đoán xác định sự nhiễm sán lá gan nhỏ Clonorchis sinensis trên người. Nghiên cứu đề cập đến thực trạng nhiễm sán lá gan nhỏ tại Việt Nam và thế giới, các phương pháp chẩn đoán hiện có, cũng như nguyên lý và ứng dụng của kỹ thuật LAMP. Mục tiêu chính là thiết lập quy trình kỹ thuật LAMP để phát hiện nhiễm sán lá gan nhỏ và đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu của quy trình này trong việc xác định sán lá gan nhỏ Clonorchis sinensis trên mẫu phân thu thập từ người bệnh. Tài liệu này cung cấp thông tin chi tiết về đặc điểm sinh học, chu kỳ phát triển, cấu trúc di truyền của sán lá gan nhỏ, đồng thời so sánh hiệu quả của kỹ thuật LAMP với các phương pháp chẩn đoán khác.

Mục lục chi tiết:

• Lời cảm ơn
• Danh mục chữ viết tắt
• Mở đầu
• Chương 1: Tổng quan tài liệu
• 1.1. Bệnh sán lá gan nhỏ
• 1.1.1. Các triệu chứng lâm sàng
• 1.1.2. Các phương pháp chẩn đoán
• 1.2. Đặc điểm phân loại, hình thái của sán lá gan nhỏ Clonorchis sinensis
• 1.2.1. Phân loại
• 1.2.2. Hình thái sán lá gan nhỏ Clonorchis sinensis
• 1.2.2.1. Sán trưởng thành
• 1.2.2.2. Đặc điểm hình thái trứng sán lá gan nhỏ
• 1.3. Chu kỳ phát triển của sán lá gan nhỏ
• 1.4. Một số đặc điểm di truyền phân tử của sán lá gan nhỏ sử dụng trong giám định loài
• 1.4.1. DNA ribosome(rDNA)trong hệ gen nhân
• 1.4.2. Hệ gen ty thể mtDNA
• 1.5. Thực trạng nhiễm sán lá gan nhỏ trên thế giới và Việt Nam
• 1.5.1 Thực trạng nhiễm sán lá gan nhỏ trên thế giới
• 1.5.2. Thực trạng nhiễm sán lá gan nhỏ ở Việt Nam
• 1.6. Các kỹ thuật xét nghiệm chẩn đoán sán lá gan nhỏ
• 1.6.1. Xét nghiệm tìm trứng sán lá gan nhỏ trong phân hoặc dịch tá tràng
• 1.6.2. Các xét nghiệm miễn dịch
• 1.6.3. Chẩn đoán bằng các kỹ thuật sinh học phân tử
• 1.7. Kỹ thuật LAMP
• 1.7.1. Nguyên lý kỹ thuật LAMP
• 1.7.2. Đánh giá kết quả của LAMP
• 1.8. Các nghiên cứu về ứng dụng kỹ thuật LAMP trong chẩn đoán C.sinensis những năm gần đây
• Chương 2: Đối tượng và phương pháp nghiên cứu
• 2.1. Đối tượng, thời gian, địa điểm, vật liệu nghiên cứu
• 2.1.1. Đối tượng nghiên cứu
• 2.1.2. Thời gian nghiên cứu
• 2.1.3. Địa điểm nghiên cứu
• 2.1.4. Hóa chất, vật tư tiêu hao, thiết bị sử dụng trong nghiên cứu
• 2.2. Phương pháp nghiên cứu
• 2.2.1. Thiết kế nghiên cứu
• 2.2.1.1. Thu thập mẫu phân, mẫu sán lá gan nhỏ trưởng thành
• 2.2.1.2. Tách ADN tổng số
• 2.2.3. Các kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu
• 2.3. Các chỉ số nghiên cứu
• 2.4. Thu thập số liệu, xử lý số liệu
• 2.5. Đạo đức trong nghiên cứu
• Chương 3: Kết quả và thảo luận
• 3.1. Kết quả nghiên cứu thiết lập quy trình kỹ thuật LAMP xác định sán lá gan nhỏ C. sinensistrên người
• 3.1.1. Kết quả thiết kế mồi cho phản ứng LAMP xác định C. sinensis
• 3.1.2. Kết quả tối ưu các điều kiện của phản ứng LAMP xác định C. sinensis
• 3.2. Kết quả đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu của kỹ thuật LAMP chẩn đoán sán lá gan nhỏ C. Sinensis trên người
• 3.2.1. Kết quả điều tra thu thập mẫu phân, mẫu sán lá gan nhỏ trưởng thành
• 3.2.2. Kết quả thiết lập bộ mẫu sử dụng để đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu của kỹ thuật LAMP chẩn đoán sán lá gan nhỏ C. sinensis
• 3.2.3. Kết quả đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu của kỹ thuật LAMP phát hiện C. sinensis trên người
• Kết luận
• Kiến nghị
• Tài liệu tham khảo