Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Nghiên cứu đặc điểm sinh học chủng xạ khuẩn Streptomyces toxytricini (VN08 – A12) kháng bệnh bạc lá lúa do Xanthomonas oryzae

Nghiên cứu đặc điểm sinh học chủng xạ khuẩn Streptomyces toxytricini (VN08 – A12) kháng bệnh bạc lá lúa do Xanthomonas oryzae

Tác giả: Nguyễn Thị Vân

Lĩnh vực: Vi sinh vật học

Nội dung tài liệu:

Luận văn này tập trung nghiên cứu về chủng xạ khuẩn Streptomyces toxytricini (VN08 – A12) với mục tiêu đánh giá khả năng kháng vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo), tác nhân gây bệnh bạc lá lúa. Nghiên cứu bao gồm việc phân loại chủng xạ khuẩn, tối ưu hóa điều kiện nuôi cấy để đạt hiệu quả sinh hoạt chất kháng khuẩn cao nhất, cũng như tinh sạch và xác định cấu trúc của hoạt chất này. Bệnh bạc lá lúa là một vấn đề nghiêm trọng trong nông nghiệp, gây thiệt hại lớn về năng suất, do đó việc tìm kiếm các giải pháp phòng trừ hiệu quả, đặc biệt là các giải pháp sinh học an toàn và thân thiện với môi trường, là vô cùng cần thiết. Xạ khuẩn, với khả năng sản sinh ra nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học, được xem là một hướng đi tiềm năng trong việc phát triển các chế phẩm sinh học phòng trừ bệnh bạc lá lúa.

Mục lục chi tiết:

• MỞ ĐẦU
• MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU
• CHƯƠNG I. TỔNG QUAN
• 1.1. Bệnh bạc lá lúa và tác hại của bệnh bạc lá lúa
• 1.1.1. Giới thiệu chung
• 1.1.2. Tác nhân gây bệnh bạc lá lúa
• 1.2. Các cách phòng trừ bệnh bạc lá lúa
• 1.2.1. Sử dụng thuốc hóa học
• 1.2.2. Chọn giống lúa kháng bệnh
• 1.2.3. Khống chế sinh học
• 1.3. Xạ khuẩn
• 1.3.1. Giới thiệu chung về xạ khuẩn
• 1.3.2. Khả năng sinh chất kháng sinh của xạ khuẩn
• 1.3.3. Sử dụng xạ khuẩn trong khống chế sinh học
• 1.4. Tình hình nghiên cứu xạ khuẩn trong kiểm soát bệnh bạc lá lúa
• CHƯƠNG 2. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Nguyên liệu và hóa chất
• 2.1.1 Nguyên liệu
• 2.1.1.1. Các chủng Xoo
• 2.1.1.2. Các chủng xạ khuẩn
• 2.1.1.3. Vi sinh vật kiểm định
• 2.1.2. Hóa chất, dụng cụ và thiết bị
• 2.1.2.1. Hóa chất
• 2.1.2.2. Dụng cụ và thiết bị
• 2.1.2.3. Môi trường nghiên cứu
• 2.2. Phương pháp nghiên cứu
• 2.2.1. Phương pháp thử hoạt tính kháng vi sinh vật
• 2.2.1.1. Phương pháp thỏi thạch
• 2.2.1.2. Phương pháp đục lỗ thạch
• 2.2.2. Phân loại bằng đặc điểm hình thái
• 2.2.2.1. Hình thái khuẩn lạc
• 2.2.2.2. Hình thái chuỗi sinh bào tử và bề mặt bào tử
• 2.2.3. Hóa phân loại
• 2.2.3.1. Phân tích thành phần axit amin trong thành tế bào
• 2.2.3.2. Phân tích thành phần menaquinone
• 2.2.3.3. Phân tích thành phần axit béo
• 2.2.3.4. Phân tích thành phần G+C trong ADN
• 2.2.4. Phân loại sinh học phân tử giải trình tự 16S – rADN
• 2.2.5. Tối ưu hóa điều kiện nuôi cấy xạ khuẩn
• 2.2.5.1. Lựa chọn môi trường nuôi cấy thích hợp
• 2.2.5.2. Lựa chọn thời gian nuôi cấy thích hợp
• 2.2.5.3. Lựa chọn thể tích nuôi cấy thích hợp
• 2.2.5.4. Lựa chọn nhiệt độ nuôi cấy
• 2.2.5.5. Lựa chọn cách cấy giống
• 2.2.6. Tinh sạch hoạt chất kháng Xoo
• 2.2.6.1. Tách dịch chiết thô
• 2.2.6.2. Tinh sạch bằng silica gel
• 2.2.6.3. Tinh sạch bằng HPLC
• 2.2.7. Xác định khối lượng phân tử bằng khối phổ (MS)
• CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. Khả năng kháng vi sinh vật của chủng xạ khuẩn VN08 – A12
• 3.2. Phân loại chủng VN08 – A12
• 3.2.1. Phân loại bằng hình thái
• 3.2.2. Hóa phân loại
• 3.2.2.1. Thành phần axit amin trong thành tế bào
• 3.2.2.2. Thành phần menaquinone
• 3.2.2.3.Thành phần axit béo
• 3.2.2.4. Thành phần G + C trong ADN
• 3.2.3. Trình tự 16S rADN
• 3.3. Tối ưu hóa điều kiện nuôi cấy của chủng VN08 – A12
• 3.3.1. Môi trường nuôi cấy thích hợp
• 3.3.2. Thời gian nuôi cấy thích hợp
• 3.3.3. Thể tích nuôi cấy thích hợp
• 3.3.4. Nhiệt độ nuôi cấy thích hợp
• 3.3.5. Cách cấy giống thích hợp
• 3.4. Tinh sạch và phân tích hoạt chất kháng Xoo của chủng VN08 – A12
• 3.4.1. Tinh sạch hoạt chất kháng Xoo của chủng VN08 – A12
• 3.4.2. Phân tích trọng lượng phân tử
• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• 4.1. Kết luận
• 4.2. Kiến nghị
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC