Luận văn Thạc sĩ Sinh học: Nghiên cứu ảnh hưởng của α-mangostin từ vỏ quả măng cụt (Garcinia mangostana L.) lên vi khuẩn Streptococcu s mutans trên biofilm và định hướng ứng dụng

Nghiên cứu ảnh hưởng của α-Mangostin từ vỏ quả Măng cụt Garcinia mangostana L. lên vi khuẩn Streptococcus mutans trên Biofilm và định hướng ứng dụng

Tác giả: Nguyễn Vũ Anh

Lĩnh vực: Sinh học thực nghiệm

Nội dung tài liệu: Luận văn thạc sĩ khoa học này tập trung nghiên cứu về ảnh hưởng của hợp chất α-mangostin, chiết xuất từ vỏ quả măng cụt (Garcinia mangostana L.), đối với vi khuẩn Streptococcus mutans (S. mutans) trong môi trường biofilm. Nghiên cứu nhằm mục đích xây dựng quy trình tách chiết α-mangostin hiệu quả, đánh giá khả năng ức chế sự sinh acid, sự hình thành biofilm và hoạt động của các enzyme liên quan của S. mutans. Đồng thời, đề tài đề xuất định hướng ứng dụng α-mangostin trong việc phát triển các sản phẩm phòng chống sâu răng mới.

Mục lục chi tiết:

• Mở đầu
• Chương 1: Tổng quan tài liệu
  • 1.1. Bệnh sâu răng và vi khuẩn Streptococcus mutans
    • 1.1.1. Bệnh học sâu răng
      • 1.1.1.1 Nguyên nhân gây sâu răng
      • 1.1.1.2. Mảng bám răng (dental plaque)
      • 1.1.1.3. Cơ chế gây sâu răng
      • 1.1.1.4. Vi khuẩn Streptococcus mutans
    • 1.1.2. Tình hình bệnh sâu răng trên thế giới và Việt Nam
    • 1.1.3. Các biện pháp ngăn ngừa sâu răng
      • 1.1.3.1. Sử dụng chất kháng khuẩn
      • 1.1.3.2. Sử dụng chất thay thế đường
      • 1.1.3.3. Liệu pháp thay thế (replacement therapy)
      • 1.1.3.4. Vacxin
      • 1.1.3.5. Kiểm soát sự hình thành biofilm
  • 1.2. Một số cơ chế thích nghi acid của vi khuẩn xoang miệng
    • 1.2.1. Bơm proton F-ATPase
    • 1.2.2. Sự thay đổi của màng tế bào vi khuẩn khi thích nghi acid
    • 1.2.3. Sự sinh các chất kiềm
      • 1.2.3.1. Urease
      • 1.2.3.2. Hệ thống arginin deiminase (ADS)
  • 1.3. Giới thiệu về cây măng cụt
    • 1.3.1. Đặc điểm sinh học
    • 1.3.2. Các chất xathone trong măng cụt
    • 1.3.3. Sinh tổng hợp các chất xanthone
    • 1.3.4. Tác dụng sinh học của các chất xanthone trong cây măng cụt
      • 1.3.4.1. Hoạt tính kháng khuẩn
      • 1.3.4.2. Hoạt tính kháng nấm
      • 1.3.4.3. Tác dụng chống oxi hóa
      • 1.3.4.4. Tác dụng chống viêm (anti-inflamation)
      • 1.3.4.5. Hoạt tính chống ung thư
• Chương 2: Nguyên liệu và phương pháp
  • 2.1. Chủng vi sinh vật và các điều kiện nuôi cấy
  • 2.2. Nguyên liệu thực vật
  • 2.3. Hóa chất và thiết bị
  • 2.4. Phương pháp nghiên cứu
    • 2.4.1. Các phương pháp nghiên cứu tế bào
      • 2.4.1.1. Chuẩn bị dịch tế bào
      • 2.4.1.2. Đo mức độ sinh acid của tế bào (pH drop)
    • 2.4.2. Các phương pháp xác định hoạt độ enzyme
      • 2.4.2.1. Chuẩn bị tế bào thấm
      • 2.4.2.2. Xác định hoạt độ enzyme phosphoryl hóa đường (PTS)
      • 2.4.2.3. Xác định hoạt độ enzyme F – ATPase
      • 2.4.2.4. Xác định hoạt độ enzyme glucosyltransferase (GTF)
    • 2.4.3. Các phương pháp nghiên cứu về biofilm
      • 2.4.3.1. Tạo biofilm
      • 2.4.3.2. Xác định thành phần biofilm
      • 2.4.3.3. Quan sát cấu trúc biofilm dưới kính hiển vi huỳnh quang quét lase
  • 2.5. Đánh giá sự tích lũy của α-mangostin trên biofilm
  • 2.6. Tinh sạch hoạt chất khoáng khuẩn S. mutans từ vỏ quả măng cụt
    • 2.6.1. Tách các hợp chất polyphenol bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng (TLC)
    • 2.6.2. Phân tích cấu trúc hóa học bằng cộng hưởng từ hạt nhân (NMR)
  • 2.7. Xử lý số liệu
• Chương 3: Kết quả và thảo luận
  • 3.1. Nghiên cứu quy trình chiết xuất α-mangostin từ vỏ quả măng cụt
    • 3.1.1. Tách chiết phân đoạn có chứa α-mangostin từ vỏ quả măng cụt
    • 3.1.2. Tinh sạch α-mangostin từ vỏ quả măng cụt
      • 3.1.2.1. Lựa chọn hệ dung môi thích hợp để chạy cột sắc ký silica gel
      • 3.1.2.2. Tinh sạch α-mangostin trên cột sắc ký silica gel sử dụng hệ dung môi n-hexane: acetone (3:1)
  • 3.2. Đánh giá tác dụng kháng khuẩn của α-mangostin lên S. mutans trên biofilm
    • 3.2.1. α-mangostin ức chế sự sinh acid của vi khuẩn S. mutans trên biofilm
      • 3.2.1.1. Ức chế sự giảm pH của môi trường
      • 3.2.1.2. α-mangostin ức chế hoạt tính enzyme liên quan đến quá trình sinh và chống chịu acid F-ATPase và PTS
    • 3.2.2. Đánh giá tác dụng ức chế sự hình thành biofilm của vi khuẩn S. mutans
      • 3.2.2.1. α-mangostin ức chế sự sinhtổng hợp EPS ngoại bào
      • 3.2.2.2. α-mangostin làm thay đổi cấu trúc biofilm của S. mutans
      • 3.2.2.3. α-mangostin ức chế hoạt tính các enzyme GTF liên quan đến sự hình thành biofilm của vi khuẩn S. mutans
  • 3.3. Khả năng giết vi khuẩn trên biofilm của α-mangostin
  • 3.4. Khả năng tích lũy của α-mangostin trên biofilm
    • 3.4.1. Bước đầu đánh giá tác dụng chống sâu răng của dung dịch nước súc miệng có chứa α-mangostin
      • 3.4.1.1. Khả năng ức chế sự sinh acid
      • 3.4.1.2. Khả năng ức chế sự hình thành biofilm (mảng bám răng)
• Chương 4: Kết luận và đề nghị
• Tài liệu tham khảo
• Phụ lục