Báo cáo khoa học: N-terminal deletion of the c subunit affects the stabilization and activity of chloroplast ATP synthase

N-terminal deletion of the y subunit affects the stabilization and activity of chloroplast ATP synthase

Tác giả: Zhang-Lin Ni, Hui Dong and Jia-Mian Wei

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Hóa sinh

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này xem xét vai trò của vùng N-terminal của tiểu đơn vị gamma (γ) trong phức hợp ATP synthase của lục lạp. Các nhà nghiên cứu đã tạo ra các dạng đột biến thiếu hụt N-terminal của tiểu đơn vị γ và đánh giá hoạt tính thủy phân ATP cũng như khả năng tương tác với tiểu đơn vị epsilon (ε). Kết quả cho thấy vùng N-terminal của tiểu đơn vị γ đóng vai trò quan trọng trong việc ổn định phức hợp enzyme và xúc tác, đồng thời không phải là vùng thiết yếu cho việc gắn kết với tiểu đơn vị ε.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Keywords
• Abbreviations
• Results
• Overexpression and assembly of the γ truncated mutants
• ATP hydrolytic activity of the mutant assemblies
• Interaction of subunits γ and ε in vitro
• Inhibitory effects of the ε subunit
• Discussion
• Experimental procedures
• Materials
• Generation of γ truncation mutants and GST-fusion protein
• Solubilization and folding of overexpressed γ mutants and GST-fusion protein
• Preparation and reconstitution of an αβ complex and γ mutants
• In vitro binding assays of ε with γ subunit and immunoblotting analysis
• CF₁ and CF₁ (-δε) preparation and measurement of ATPase activity
• Acknowledgements
• References