Myristoylation Of The Dual-Specificity Phosphatase C-JUN N-terminal Kinase (JNK) Stimulatory Phosphatase 1 Is Necessary For Its Activation Of JNK Signaling And Apoptosis

Myristoylation of the dual-specificity phosphatase c-JUN N-terminal kinase (JNK) stimulatory phosphatase 1 is necessary for its activation of JNK signaling and apoptosis

Tác giả: Ulla Schwertassek, Deirdre A. Buckley, Chong-Feng Xu, Andrew J. Lindsay, Mary W. McCaffrey, Thomas A. Neubert, Nicholas K. Tonks

Lĩnh vực: Khoa học Y sinh, Sinh hóa

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá vai trò của myristoylation trong việc điều hòa chức năng của phosphatase c-JUN N-terminal kinase (JNK) stimulatory phosphatase 1 (JSP1). Kết quả cho thấy JSP1 được myristoylated tại đầu N-terminus, một quá trình không cần thiết cho hoạt tính phosphatase nội tại nhưng lại cần thiết cho sự định vị dưới tế bào của enzyme. Sự thay đổi trong định vị dưới tế bào này ảnh hưởng đến khả năng của JSP1 trong việc kích hoạt tín hiệu JNK và gây ra hiện tượng apoptosis khi biểu hiện quá mức.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Results
• JSP1 was myristoylated in cells
• JSP1 phosphatase activity was not dependent on myristoylation
• Myristoylation regulated the subcellular localization of JSP1
• Myristoylation was necessary for JSP1-induced activation of JNK
• JSP1-wt, but not the myristoylation mutant, induced cell death
• Discussion
• Experimental procedures
• Mammalian expression constructs
• Cell culture, transfection and lysate preparation
• Immunoblot analysis
• Protein expression and purification
• Assay of protein phosphatase activity
• Counting of floating cells
• Microscopic analysis
• Mass spectrometry
• Acknowledgements
• References