Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 13 trang
Dung lượng: 220 KB

Giới thiệu nội dung

A Mammalian Dctpase That Prefers 5-Iodocytosine

Tác giả: Mari Nonaka, Daisuke Tsuchimoto, Kunihiko Sakumi và Yusaku Nakabeppu

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này xác định protein RS21-C6 là một enzyme deoxynucleoside triphosphate pyrophosphohydrolase (dCTPase) có ái lực cao hơn đối với 5-iodocytosine (5-I-dCTP) so với deoxynucleoside triphosphate (dCTP) thông thường. RS21-C6 được biểu hiện ở cả tế bào đang phân chia và không phân chia, và nằm trong bào tương. Enzyme này có khả năng thủy phân dCTP thành dCMP, một tiền chất quan trọng cho quá trình tổng hợp dTTP mới. RS21-C6 cũng có thể đóng vai trò trong việc ngăn ngừa methyl hóa DNA không phù hợp, ngăn chặn sao chép DNA hoặc đột biến bằng cách thủy phân dCTP đã biến đổi. Nghiên cứu cũng khám phá các đặc tính động học của RS21-C6, bao gồm ái lực với các cơ chất khác nhau và các điều kiện tối ưu cho hoạt động enzyme.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả
  • Chuẩn bị ITP-agarose
  • Các protein liên kết ITP
  • Hoạt động Nucleoside triphosphate pyrophosphohydrolase của protein RS21-C6
  • Thảo luận
  • Các vai trò sinh học của RS21-C6
  • Quy trình thực nghiệm
  • Các oligonucleotide tổng hợp
  • Nucleotides
  • Chuẩn bị dịch chiết tuyến ức chuột
  • Chuẩn bị ITP-agarose
  • Tinh sạch và nhận diện các protein liên kết ITP
  • Phân lập cDNA RS21-C6
  • Xây dựng các plasmid biểu hiện
  • Biểu hiện và tinh sạch protein RS21-C6 tái tổ hợp
  • Phân tích PCR định lượng thời gian thực
  • Nuôi cấy tế bào
  • Phân tách tế bào gan chuột
  • Tài liệu tham khảo