Mixed lineage kinase LZK and antioxidant protein-1 activate NF-kB synergistically

Mixed lineage kinase LZK and antioxidant protein-1 activate NF-kB synergistically

Tác giả: Megumi Masaki, Atsushi Ikeda, Eriko Shiraki, Shogo Oka, Toshisuke Kawasaki

Lĩnh vực: Department of Biological Chemistry and CREST (Core Research for Educational Science and Technology) Project, Japan Science and Technology Corporation, Graduate School of Pharmaceutical Sciences, Kyoto University, Kyoto, Japan

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá mối liên hệ giữa enzyme kinase kinase dòng hỗn hợp (LZK) và protein chống oxy hóa-1 (AOP-1) trong việc kích hoạt yếu tố phiên mã NF-κB. LZK là một thành viên mới của họ kinase dòng hỗn hợp (MLK), trước đây đã được chứng minh là kích hoạt con đường kinase c-Jun N-terminal (JNK). Thông qua hệ thống sàng lọc hai lai nấm men, AOP-1 đã được xác định là một phân tử liên kết với LZK và điều chỉnh hoạt động của nó. Nghiên cứu cho thấy LZK kích hoạt yếu tố phiên mã NF-κB phụ thuộc vào quá trình phosphoryl hóa và kích hoạt phức hợp IκB kinase (IKK). Điều thú vị là AOP-1 không ảnh hưởng đến hoạt động của LZK đối với con đường JNK, nhưng lại tăng cường mạnh mẽ khả năng kích hoạt NF-κB của LZK. AOP-1 cũng được chứng minh là liên kết trực tiếp với phức hợp IKK thông qua LZK, cho thấy một cơ chế phối hợp trong việc điều hòa tín hiệu NF-κB.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Experimental procedures
• Plasmids, antibodies and reagents
• Yeast two-hybrid assay
• Cell culture and transfection
• Reporter assay
• Preparation of GST-IkBa
• IKK kinase assay
• Results
• Identification of AOP-1 as a molecule binding to LZK
• Antioxidant activity of AOP-1 is not essential for its association with LZK
• AOP-1 has no effect on LZK-induced JNK activation
• AOP-1 enhances LZK-induced NF-kB activation
• LZK activates the IkB kinase complex
• LZK associates with the IkB kinase complex
• Discussion
• Acknowledgements
• References