Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 8 trang
Dung lượng: 184 KB

Giới thiệu nội dung

Leishmania donovani methionine adenosyltransferase: Role of cysteine residues in the recombinant enzyme

Tác giả: Yolanda Pérez-Pertejo, Rosa M. Reguera, Hector Villa, Carlos García-Estrada, Rafael Balaña-Fouce, Maria A. Pajares, David Ordóñez

Lĩnh vực: Dược lý và Độc chất học, Sinh hóa

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này mô tả việc nhân bản, biểu hiện và gấp nếp chức năng của gen MAT (methionine adenosyltransferase) từ Leishmania donovani, tác nhân gây bệnh leishmaniasis nội tạng. Việc protein MAT tái tổ hợp chỉ gấp nếp đúng trong môi trường khử, cùng với sự bất hoạt nhanh chóng bởi N-ethylmaleimide, cho thấy sự hiện diện của các gốc cysteine quan trọng trong cấu trúc chính của protein MAT. Nghiên cứu đã thực hiện đột biến tại bảy gốc cysteine và đánh giá vai trò của chúng đối với hoạt động tổng hợp S-adenosylmethionine (AdoMet) và thủy phân tripolyphosphate (PPP;). Kết quả cho thấy nhiều gốc cysteine là cần thiết cho cả hai hoạt động enzym, với một số gốc đóng vai trò quan trọng hơn trong bước tổng hợp AdoMet.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và phương pháp
    • Hóa chất, tế bào và thư viện
    • Khuếch đại đoạn mã hóa MAT2
    • Nhân bản gen L. donovani MAT-II (gen MAT2)
    • Đột biến định hướng vị trí
  • Biểu hiện và gấp nếp quá mức của MAT-II
  • Định lượng MAT
  • Hoạt động Tripolyphosphatase
  • Kết quả và thảo luận