Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 12 trang
Dung lượng: 276 KB

Giới thiệu nội dung

Interaction with model membranes and pore formation by human stefin B – studying the native and prefibrillar states

Tác giả: Sabina Rabzelj, Gabriella Viero, Ion Gutiérrez-Aguirre, Vito Turk, Mauro Dalla Serra, Gregor Anderluh, Eva Žerovnik

Lĩnh vực: Biochemistry and Molecular Biology, Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào sự tương tác của stefin B, một protein thuộc họ cystatin, với màng lipid, đặc biệt là khả năng hình thành lỗ (pore formation) của protein ở trạng thái tự nhiên và tiền sợi. Ba biến thể của stefin B đã được khảo sát: dạng Y31, dạng hoang dã (wild-type) và dạng đột biến G4R (liên quan đến bệnh động kinh giật tiến triển type 1). Các phương pháp như áp suất tới hạn, cộng hưởng plasmon bề mặt và đo điện sinh lý đã được sử dụng để đánh giá sự tương tác này. Kết quả cho thấy stefin B dạng hoang dã và dạng Y31 có khả năng tạo lỗ trong màng lipid phẳng, trong khi dạng G4R lại phá hủy màng theo một cơ chế không tạo lỗ. Nghiên cứu cũng so sánh các đặc tính của stefin B với các protein amyloidogenic khác và thảo luận về ý nghĩa sinh lý tiềm tàng của những phát hiện này.

Mục lục chi tiết:

  • Keywords
  • Correspondence
  • Present address
  • Pore formation of stefin B into lipid membranes
  • Results
  • Insertion into lipid monolayers
  • Permeabilization of large unilamelar vesicles (LUV)
  • Surface plasmon resonance (SPR) measurements
  • Planar lipid membrane (PLM) experiments
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Materials
  • Protein isolation
  • Preparing the prefibrillar aggregates
  • Oligomeric state
  • Liposome permeabilization assay
  • PLM
  • SPR
  • Acknowledgements
  • References