Interaction Between Lim15/Dmc1 and the Homologue of the Large Subunit of CAF-1 – A Molecular Link Between Recombination and Chromatin Assembly During Meiosis

Interaction Between Lim15/Dmc1 and the Homologue of the Large Subunit of CAF-1 – A Molecular Link Between Recombination and Chromatin Assembly During Meiosis

Tên đề tài: Interaction Between Lim15/Dmc1 and the Homologue of the Large Subunit of CAF-1 – A Molecular Link Between Recombination and Chromatin Assembly During Meiosis

Tác giả: Satomi Ishii, Akiyo Koshiyama, Fumika N. Hamada, Takayuki Y. Nara, Kazuki Iwabata, Kengo Sakaguchi and Satoshi H. Namekawa

Lĩnh vực: Applied Biological Science, Faculty of Science and Technology, Tokyo University of Science, Japan

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá mối liên hệ giữa tái tổ hợp và lắp ráp nhiễm sắc thể trong quá trình giảm phân. Cụ thể, nghiên cứu báo cáo rằng yếu tố tái tổ hợp đặc hiệu cho giảm phân Lim15/Dmc1 tương tác với đồng đẳng của tiểu đơn vị lớn nhất của yếu tố lắp ráp nhiễm sắc thể 1 (CAF-1) ở nấm Tựa Tác Nhân (Coprinopsis cinerea). Yếu tố đồng đẳng này, được đặt tên là CcCac1L, đã được xác định thông qua phương pháp lai hai sinh. Các thí nghiệm lai hai sinh và β-galactosidase đã xác nhận sự tương tác giữa CcCac1L và CcLim15. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng CcCac1L tương tác với PCNA (proliferating cell nuclear antigen), một thành phần của bộ máy tổng hợp DNA, gần đây đã được báo cáo là đối tác tương tác của Lim15/Dmc1. Tổng hợp lại, các kết quả này gợi ý một vai trò mới của phức hợp CAF-1-PCNA trong các sự kiện giảm phân, trong đó phức hợp này có thể điều chỉnh quá trình lắp ráp nhiễm sắc thể sau quá trình tái tổ hợp giảm phân.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Results
• Isolation of Coprinopsis cinerea Cac1-like (CcCac1L) by two-hybrid screening using CcLim15 as bait
• CcCac1L interacts with CcLim15
• Characterization of CcCac1L during meiosis
• Interaction between CcCac1L and CCPCNA during meiosis
• Discussion
• Materials and methods
• Culture of C. cinerea and collection of fruiting bodies
• Yeast two-hybrid screening
• cDNA cloning of CcCac1L
• Two-hybrid assay
• Northern blotting
• Antibodies
• In vivo co-immunoprecipitation
• Proteins
• Surface plasmon resonance
• Acknowledgements
• References