Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 249 KB

Giới thiệu nội dung

Identification of mammalian-type transglutaminase in Physarum polycephalum

Tác giả: Fumitaka Wada, Akio Nakamura, Tomohiro Masutani, Koji Ikura, Masatoshi Maki và Kiyotaka Hitomi

Lĩnh vực: Sinh học Ứng dụng

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày việc xác định và mô tả trình tự cDNA của enzyme transglutaminase (TGase) loại giống động vật có vú trong sinh vật đơn bào Physarum polycephalum. Phát hiện này đáng chú ý vì đây là sinh vật hạ đẳng đầu tiên được tìm thấy có TGase mang đặc điểm tương đồng với động vật có vú. Kết quả nghiên cứu cho thấy enzyme này không chỉ có hoạt tính xúc tác transamid hóa mà còn có khả năng thủy phân GTP, và hoạt tính này bị ức chế bởi GTP. Điều này chỉ ra rằng P. polycephalum là sinh vật hạ đẳng nhất sở hữu các đặc điểm của TGase loại 2 ở động vật có vú.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và Phương pháp
  • Nuôi cấy plasmodia
  • Tinh sạch PpTGase
  • Phân cắt PpTGase bằng CNBr và xác định trình tự amino acid
  • 3′ RACE
  • 5′ RACE
  • Phân tích máy tính
  • Phân tích Northern blot
  • Biểu hiện của PpTGase tái tổ hợp trong E. coli
  • Đo hoạt tính TGase
  • Ảnh hưởng của các nucleotide lên hoạt tính TGase
  • Xét nghiệm thủy phân GTP của TGase 2, TGase 3 và PpTGase
  • Kết quả
  • Tinh sạch PpTGase
  • Phân cắt và tinh sạch PpTGase
  • Nhân dòng và trình tự cDNA
  • Hình ảnh cDNA và trình tự amino acid suy luận của PpTGase
  • Sự tương đồng về trình tự của các vùng tương tự cao của PpTGase với các TGase sinh vật nhân thực khác
  • Phân tích Northern blot và Western blot của PpTGase
  • Sự liên quan của GTP trong chức năng của PpTGase
  • Thảo luận
  • Trình tự cDNA của PpTGase
  • Vai trò có thể có của PpTGase
  • Kết luận
  • Lời cảm ơn
  • Tài liệu tham khảo