Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 8 trang
Dung lượng: 167 KB

Giới thiệu nội dung

Fusion of farnesyldiphosphate synthase and epi-aristolochene synthase, a sesquiterpene cyclase involved in capsidiol biosynthesis in Nicotiana tabacum

Tác giả: Maria Brodelius, Anneli Lundgren, Per Mercke, Peter E. Brodelius

Lĩnh vực: Hóa học và Khoa học Y sinh, Đại học Kalmar, Thụy Điển; Hóa sinh Thực vật, Đại học Lund, Thụy Điển

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này mô tả việc tạo ra các enzyme hai chức năng bằng cách nối gen mã hóa farnesyldiphosphate synthase (FPPS) và epi-aristolochene synthase (eAS). Các enzyme kết hợp này có khả năng xúc tác cho quá trình chuyển hóa isopentenyl diphosphate thành epi-aristolochene thông qua một phản ứng nối tiếp. Kết quả cho thấy các enzyme hai chức năng này thể hiện hiệu quả chuyển đổi cao hơn so với việc sử dụng các enzyme đơn lẻ. Nghiên cứu cũng thảo luận về tiềm năng ứng dụng của các enzyme hai chức năng trong kỹ thuật di truyền để cải thiện sinh tổng hợp sesquiterpene trong thực vật.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Tài liệu và Phương pháp
  • Nhân bản gen FPPS từ Artemisia annua
  • Nhân bản gen FPPS và eAS
  • Xây dựng các vector biểu hiện để sản xuất enzyme đơn lẻ và enzyme dung hợp
  • Giải trình tự DNA
  • Biểu hiện protein tái tổ hợp và chuẩn bị dịch chiết từ vi khuẩn
  • Tối ưu hóa biểu hiện
  • Sản xuất và tinh sạch protein tái tổ hợp
  • Điện di và Western blot
  • Các phép thử enzyme
  • Phép thử enzyme kết hợp
  • Nồng độ protein
  • Kết quả và Thảo luận
  • Biểu hiện của các enzyme tái tổ hợp
  • Đặc tính động học của các enzyme tái tổ hợp
  • Hoạt động kết hợp
  • Nhận xét chung