Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 13 trang
Dung lượng: 284 KB

Giới thiệu nội dung

Conformational Studies of a Hyperthermostable Enzyme

Tác giả: Sotirios Koutsopoulos, John van der Oost, Willem Norde

Lĩnh vực: Hóa lý và Khoa học keo, Vi sinh vật học, Kỹ thuật y sinh

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này tập trung vào việc khám phá các đặc điểm cấu trúc của enzyme hyperthermostable endo-β-1,3-glucanase (LamA) từ Pyrococcus furiosus dưới các điều kiện nhiệt độ khắc nghiệt và nồng độ guanidine hydrochloride (GdnHCl) cao. Bằng cách sử dụng phổ circular dichroism (CD), phổ huỳnh quang trạng thái ổn định và phân giải thời gian, cùng với phép đo đo độ bất đẳng hướng, các nhà nghiên cứu đã có thể phân biệt các trạng thái cấu trúc khác nhau của enzyme, bao gồm trạng thái gấp lại một phần, gấp lại một phần và hoàn toàn không gấp lại. Các phương pháp quang phổ đã cho thấy sự thay đổi trong môi trường cục bộ xung quanh các gốc tryptophan khi enzyme trải qua các quá trình biến đổi cấu trúc. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng enzyme duy trì tính toàn vẹn cấu trúc ở nồng độ GdnHCl lên tới 5.5 M, nhưng có những thay đổi cấu trúc đáng kể ở nồng độ 8 M GdnHCl. Kết quả cung cấp cái nhìn sâu sắc về sự ổn định và khả năng thích ứng của enzyme hyperthermostable trong các điều kiện môi trường khắc nghiệt.

Mục lục chi tiết:

  • Keywords
  • Correspondence
  • Abstract
  • Introduction
  • Results
  • Circular dichroism (CD)
  • Steady-state fluorescence spectroscopy
  • 8-Anilino naphthalene-1-sulfonic acid (ANS) fluorescence spectroscopy measurements
  • Time-resolved fluorescence decay
  • Time-resolved anisotropy decay
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Purification of LamA, treatment and chemicals
  • Circular dichroism
  • Steady-state fluorescence spectroscopy
  • Picosecond polarized time-resolved fluorescence and anisotropy
  • Time-resolved data analysis
  • References
  • Acknowledgements