Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 15 trang
Dung lượng: 250 KB

Giới thiệu nội dung

13C Isotopologue Editing Of Fmn Bound To Phototropin Domains

Tác giả: Wolfgang Eisenreich, Monika Joshi, Boris Illarionov, Gerald Richter, Werner Römisch-Margl, Franz Müller, Adelbert Bacher, Markus Fischer

Lĩnh vực: Hóa học Hữu cơ và Sinh hóa, Khoa học Hóa học, Hóa sinh và Hóa học Thực phẩm

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày một phương pháp mới để chỉ định các tín hiệu NMR 13C của các phân tử FMN gắn với các miền LOV của thụ thể ánh sáng xanh lam, phototropin. Bằng cách sử dụng thư viện FMN được đánh dấu bằng 13C, các nhà nghiên cứu đã có thể gán tất cả các tín hiệu 13C NMR của FMN gắn với miền LOV1 và LOV2 của Avena sativa và miền LOV2 của dương xỉ Adiantum capillus-veneris. Kết quả cho thấy sự thay đổi khác nhau trong các tín hiệu hóa học 13C của FMN khi phức hợp với các miền LOV, cho thấy sự khác biệt tinh tế trong tương tác liên kết giữa FMN và các apoprotein. Phương pháp này mở ra một con đường mới để gán các nguyên tử cacbon trong phổ NMR 13C của các cofactor flavin gắn với protein.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Từ khóa
  • Thư tín
  • Tóm tắt
  • Tổ chức của các thụ thể phototropin được sử dụng trong nghiên cứu này
  • Cấu trúc của miền LOV2 tái tổ hợp của dương xỉ Adiantum capillus-veneris
  • Sự hình thành một liên hợp cộng hóa trị cysteinyl-flavin-C(4a)
  • Các miền LOV1 và LOV2 của Avena sativa
  • Kết quả
  • Chuẩn bị các thư viện isotopologue của FMN
  • Chuẩn bị các gen tổng hợp mã hóa cho miền LOV1 và LOV2 của A. sativa phototropin NPH1-1
  • Chuẩn bị gen tổng hợp mã hóa cho miền LOV2 của A. capillus-veneris phototropin PHY3
  • Sự chuyển đổi các tế bào vi khuẩn
  • Nuôi cấy vi khuẩn
  • Phân lập protein
  • Phân cắt bằng thrombin
  • Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C
  • Xác định độ làm giàu 13C
  • Thảo luận
  • Tài liệu tham khảo
  • Tài liệu bổ sung