Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 12 trang
Dung lượng: 437 KB

Giới thiệu nội dung

Molecular Characterization Of The Amplified Aldehyde Oxidase From Insecticide Resistant Culex Quinquefasciatus

Tác giả: Michael Coleman, John G. Vontas, Janet Hemingway

Lĩnh vực: Biochemistry, Entomology, Molecular Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân tích cấu trúc và chức năng của enzyme aldehyde oxidase (AO) được khuếch đại ở muỗi Culex quinquefasciatus kháng thuốc trừ sâu. Các nhà khoa học đã lần đầu tiên thu thập thông tin cấu trúc sơ bộ, bao gồm trình tự nucleotide hoàn chỉnh của AO từ muỗi Culex quinquefasciatus. Protein AO được mã hóa có khối lượng phân tử 150 kDa với 1266 axit amin, chứa miền liên kết molybdopterin và hai trung tâm sắt-lưu huỳnh. So sánh các chuỗi AO riêng lẻ từ các chủng muỗi kháng và nhạy cảm đã chỉ ra hai alen khác biệt của enzyme này, trong đó một alen được khuếch đại trên một đoạn amplicon DNA 30 kb cùng với hai esterase liên quan đến kháng thuốc. Sự khuếch đại gen AO dẫn đến hoạt tính AO tăng cao ở tất cả các giai đoạn phát triển, nhưng cao nhất ở ấu trùng giai đoạn thứ ba. Các bằng chứng cho thấy AO có thể đóng vai trò trong cơ chế kháng thuốc trừ sâu, đặc biệt là qua khả năng oxy hóa các hợp chất ngoại lai.

Mục lục chi tiết:

  • Primary structural information including the complete nucleotide sequence of the first insect aldehyde oxidase (AO)
  • The amplified AO gene results in elevated AO activity
  • Culex mosquitoes are major vectors of filariasis and Japanese encephalitis
  • The AO may have a direct role in insecticide resistance
  • Cytochrome P450s have traditionally been thought of as the sole enzyme system associated with increased levels of insecticide oxidation
  • Experimental Procedures
  • Mosquito strains
  • Synthesis of cDNA and sequencing of AO
  • 3′ RACE
  • 5′ PCR
  • DNA sequencing
  • Genomic Southern blots
  • Aldehyde oxidase assay
  • Measurement of aldehyde dehydrogenase (ALDH) activity
  • Protein assay
  • Inhibition of AO activity by pesticides and inhibitors
  • Electrophoresis
  • Results
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References