Báo cáo “Phân tách protease ngoại bào của Bacillus subtilis trong hệ hai pha nước PEG/Potassium phosphate “

Partitioning Of Extracellular Protease From Bacillus Subtilis In Peg/Potassium Phosphate Aqueous Two-Phase Systems

Tác giả: Nguyen Hoang Loc, Luu Thi Nguyet Minh, Do Thi Bich Thuy

Lĩnh vực: Institute of Resources, Environment and Biotechnology, Hue University; College of Agriculture and Forestry, Hue University

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân tách protease ngoại bào từ dịch nuôi cấy của chủng Bacillus subtilis C10 bằng hệ hai pha nước (ATPS) được tạo thành từ polyethylene glycol (PEG) và potassium phosphate. Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình phân tách như nồng độ và khối lượng phân tử của PEG, cùng với nồng độ potassium phosphate đã được khảo sát. Kết quả cho thấy hệ ATPS tối ưu bao gồm 20% (w/w) PEG 6000 và 15% (w/w) potassium phosphate ở pH 7.0. Hệ số phân tách protease (Kprotease) đạt 4.99 với hiệu suất thu hồi protease ở pha trên (Y) là 90.25% ở nhiệt độ phòng. Hoạt độ riêng của protease ngoại bào ở pha trên là 0.33 unit/mg. Nghiên cứu đề xuất phương pháp này là một cách tiếp cận nhanh chóng và tiện lợi để tinh sạch protease.

Mục lục chi tiết:

• SUMMARY
• INTRODUCTION
• MATERIALS AND METHODS
• Chemicals
• Bacillus subtilis C10 culture and protease production
• Protease activity assay
• Total protein determination
• Preparation of aqueous two-phase systems
• RESULTS AND DISCUSSION
• Bacillus subtilis C10 culture and protease production
• Partitioning of protease and total protein
• Effect of PEG concentration and molecular weight
• Effect of potassium phosphate concentration
• Specific activity and partitioning yield of protease in the top phase
• CONCLUSION