Báo cáo khoa học: alanine-extradiol cleavage is followed by intramolecular cyclization in lincomycin biosynthesis

L-3,4-Dihydroxyphenyl alanine-extradiol cleavage is followed by intramolecular cyclization in lincomycin biosynthesis

Tác giả: Jitka Novotná, Aleš Honzátko, Petr Bednář, Jan Kopecký, Jiří Janata, Jaroslav Spížek

Lĩnh vực: Hóa sinh, Vi sinh vật học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định vai trò của protein LmbB1 trong quá trình sinh tổng hợp lincomycin. Các nhà khoa học đã biểu hiện thành công protein LmbB1 trong vi khuẩn E. coli, tinh sạch và phân tích sản phẩm phản ứng của nó. Kết quả cho thấy LmbB1 là một enzyme dioxygenase xúc tác cho phản ứng cắt 2,3-extradiol của vòng thơm L-3,4-dihydroxyphenyl alanine (L-DOPA). Sản phẩm phản ứng cuối cùng là một hợp chất độc đáo, 4-(3-carboxy-3-oxo-propenyl)-2,3-dihydro-1H-pyrrole-2-carboxylic acid, được hình thành thông qua quá trình đóng vòng nội phân tử của sản phẩm cắt ban đầu, 2,3-secodopa. Nghiên cứu cũng thảo luận về vai trò tiềm năng của LmbB1 trong quá trình đóng vòng 2,3-secodopa và các con đường đóng vòng thay thế trong việc hình thành các hợp chất liên quan về mặt sinh tổng hợp như muscaflavin và stizolobinic acid.

Mục lục chi tiết:

• L-3,4-Dihydroxyphenyl alanine-extradiol cleavage is followed by intramolecular cyclization in lincomycin biosynthesis
• Authors
• Affiliations
• Abstract
• Keywords
• Introduction
• Materials and methods
• Chemicals and reagents
• Strains
• Plasmids
• Expression of the His-LmbB1
• LmbB1 activity monitoring
• Preparation of the LmbB1 reaction product
• Preparative electrophoresis of the LmbB1 reaction product
• Capillary electrophoresis
• Capillary electrophoresis-mass spectrometry
• Results and Discussion
• Production and purification of His-LmbB1
• LmbB1 protein oligomerization
• Isolation and analysis of the LmbB1 reaction product
• Acknowledgements
• References