Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: Đang cập nhật

Giới thiệu nội dung

A superoxide dismutase–human hemoglobin fusion protein showing enhanced antioxidative properties

Tác giả: Marie Grey, Sakda Yainoy, Virapong Prachayasittikul, Leif Bülow

Lĩnh vực: Biochemistry, Chemical Engineering, Clinical Microbiology

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này trình bày việc phát triển một protein hợp nhất mới, kết hợp superoxide dismutase (SOD) và hemoglobin (Hb) của con người, nhằm mục đích giảm độc tính của Hb và tăng cường đặc tính chống oxy hóa. Protein hợp nhất SOD-Hb được tạo ra bằng cách biểu hiện gen của chuỗi α-hemoglobin người cùng với gen của men gan mangan (manganese SOD) trong vi khuẩn Escherichia coli. Kết quả cho thấy protein SOD-Hb duy trì khả năng gắn oxy, giảm đáng kể sự hình thành ferrylHb (HbFe⁴+) gây độc khi tiếp xúc với các gốc siêu oxit, đồng thời có tốc độ tự oxy hóa thấp hơn 44% và độ bền nhiệt cao hơn so với Hb đơn lẻ. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng protein hợp nhất này có tiềm năng ứng dụng trong các sản phẩm y sinh học, đặc biệt là các chất thay thế máu, do khả năng bảo vệ phân tử heme khỏi bị biến tính trong điều kiện stress oxy hóa.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Nội dung tài liệu
  • Mục lục chi tiết
  • Keywords
  • Correspondence
  • (Received 13 May 2009, revised 27 July 2009, accepted 24 August 2009)
  • doi:10.1111/j.1742-4658.2009.07323.x
  • Much of the toxicity of Hb…
  • Introduction
  • The toxicity of Hb outside…
  • HbFe2+O2 + H2O2…
  • HbFe2+O2 → HbFe3+ + O¯
  • HbFe3+ + H2O2 → *HbFe⁴+=O + H2O
  • HbFe+=O + H2O2…
  • Superoxide can be reduced…
  • Abbreviations
  • DSC, differential scanning calorimetry…
  • FEBS Journal 276 (2009) 6195-6203…
  • An Hb fusion protein with antioxidative properties
  • M. Grey et al.
  • Fig. 1. The results of SDS/PAGE…
  • Molecular mass determination
  • Molecular masses were determined…
  • Activity measurements
  • The SOD activity assay…
  • In the CO and O2 binding…
  • Fig. 2. Schematic representation of SOD-Hb…
  • Fig. 3. Reduced SOD-Hb and Hb…
  • Autoxidation studies were performed…
  • Stability
  • Thermal stability was investigated…
  • Fig. 4. DSC was performed…
  • Heme reactivity
  • Heme loss is dependent…
  • Fig. 5. FerrylHb formation was measured…
  • Fig. 6. The formation of fluorescent…
  • Discussion
  • The proximity between two proteins…
  • Experimental procedures
  • Construction of human manganese SOD and human SOD-Hb
  • Please see the Supporting information…
  • Protein expression and purification
  • Protein expression and purification…
  • Molecular mass determination
  • Gel filtration chromatography was used…
  • SOD activity assay
  • The assay used to determine SOD activity…
  • DSC
  • DSC measurements were performed…
  • Heme loss rates
  • The heme exchange rate…