Báo cáo khoa học: A 49 kDa microtubule cross-linking protein from Artemia franciscana is a coenzyme A-transferase

A 49 kDa Microtubule Cross-Linking Protein From Artemia Franciscana Is A Coenzyme A-Transferase

Tên đề tài: A 49 kDa Microtubule Cross-Linking Protein From Artemia Franciscana Is A Coenzyme A-Transferase

Tác giả: Mindy M. Oulton, Reinout Amons, Ping Liang, và Thomas H. MacRae

Lĩnh vực: Sinh hóa học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này mô tả việc xác định danh tính và chức năng của protein p49, một protein có khả năng liên kết chéo các vi ống (microtubules) được tìm thấy trong phôi và ấu trùng của tôm Brine Shrimp (Artemia franciscana). Dựa trên trình tự peptide thu được từ quá trình Edman degradation và kỹ thuật RT-PCR, các nhà nghiên cứu đã xác định được trình tự amino acid của p49. Kết quả cho thấy p49 có sự tương đồng với các sản phẩm gen tương ứng ở các loài như Drosophila, Anopheles và Caenorhabditis, cũng như các protein tương tự ở một số vi khuẩn. Quan trọng hơn, protein p49 tinh khiết đã thể hiện hoạt tính xúc tác của enzyme 4-hydroxybutyrate CoA-transferase, khẳng định p49 là một enzyme CoA-transferase đầu tiên được mô tả ở loài giáp xác. Nghiên cứu cũng khám phá sự hiện diện của một protein tương tự ở Drosophila, mặc dù với mức độ liên kết với vi ống thấp hơn.

Mục lục chi tiết:

• Experimental procedures
• Preparation of Artemia and Drosophila cell-free extracts
• Purification of p49, gel electrophoresis and protein immunodetection
• Co-assembly of Artemia p49 and tubulin
• Detection of a Drosophila p49 analogue
• 4-Hydroxybutyrate CoA-transferase assay
• Sequencing of p49 peptides
• Cloning and sequencing of p49 cDNA
• Sequence analysis of p49
• Results
• Purification of p49
• Sequencing of p49
• Identification of p49 as a CoA-transferase by sequence analysis
• Higher order structure of p49
• Drosophila contain a p49 analogue
• Discussion
• Acknowledgements
• References