Activation of hepatocyte growth factor activator zymogen (pro-HGFA) by human kallikrein 1-related peptidases

Activation Of Hepatocyte Growth Factor Activator Zymogen (pro-HGFA) By Human Kallikrein 1-Related Peptidases

Tác giả: Shoichiro Mukai, Tsuyoshi Fukushima, Daiji Naka, Hiroyuki Tanaka, Yukio Osada and Hiroaki Kataoka

Lĩnh vực: Department of Pathology, Faculty of Medicine, University of Miyazaki, Japan; Department of Urology, Faculty of Medicine, University of Miyazaki, Japan; Mitsubishi Chemical Medience Corporation R&D and Business Development Segment, Tokyo, Japan

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá vai trò của các peptidase liên quan đến kallikrein 1 ở người (KLKs) trong việc kích hoạt pro-HGFA, một tiền chất của yếu tố tăng trưởng tế bào gan (HGF/SF). KLK4 và KLK5 đã được xác định là những chất kích hoạt mới của pro-HGFA, có khả năng xử lý pro-HGFA tại cùng một vị trí với thrombin. KLK5 thể hiện hiệu quả kích hoạt cao hơn KLK4 và có thể thúc đẩy sự lan tỏa và xâm nhập của tế bào trong các thử nghiệm in vitro. Phát hiện này gợi ý một cơ chế mới về sự tiến triển của khối u, trong đó các KLKs do tế bào u tiết ra có thể kích hoạt HGFA ngoại bào, từ đó khởi động các sự kiện dẫn đến sự tiến triển của khối u thông qua thụ thể MET.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Activation of HGFA by tissue kallikreins
• Results
• Expression of KLKs in cancer cell lines
• Processing of pro-HGFA by KLKs
• Dose-dependent and time-dependent processing of pro-HGFA by KLK4 and KLK5 and the effect of dextran sulfate
• Analysis of cleavage sites of pro-HGFA by KLKs
• Inhibition of KLK-mediated pro-HGFA activation by serpins and HAI-1
• Degradation of pro-HGF/SF by KLK4 and KLK5
• Biological roles of KLK-dependent activation of HGFA
• Fig. 7. Biological activity of HGFA processed by KLK.
• Fig. 8. Effects of engineered KLK5 expression on the HGFA-HGF/SF activation cascade.
• Fig. 9. Hypothetical model for the pericellular activation of HGF/SF in tumors.
• Experimental procedures
• Cell lines and reagents
• Preparation and activation of KLKs
• RNA extraction and RT-PCR analyses
• Immunoblot analysis
• Activation of pro-HGFA by KLK
• N-terminal amino acid sequences of cleaved HGFA
• Activation of pro-HGF/SF
• Cell scattering assay and phosphorylation of MET
• Engineered expression of KLK5 and cell migration assay
• Acknowledgements
• References