Restricted localization of proline-rich membrane anchor (PRIMA) of globular form acetylcholinesterase at the neuromuscular junctions – contribution and expression from motor neurons

Restricted localization of proline-rich membrane anchor (PRIMA) of globular form acetylcholinesterase at the neuromuscular junctions – contribution and expression from motor neurons

Tác giả: K. Wing Leung, Heidi Q. Xie, Vicky P. Chen, Mokka K. W. Mok, Glanice K. Y. Chu, Roy C. Y. Choi and Karl W. K. Tsim

Lĩnh vực: Biology and Center for Chinese Medicine, The Hong Kong University of Science and Technology, China

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc tìm hiểu sự biểu hiện và định vị của neo màng giàu proline (PRIMA), một protein neo giữ cho dạng hình cầu bốn phân tử của acetylcholinesterase (AChE), tại các chỗ nối thần kinh-cơ ở động vật có xương sống. Kết quả cho thấy cả cơ và neuron vận động đều đóng góp vào mô hình biểu hiện synap này. Trong quá trình phát triển cơ chuột, sự biểu hiện của PRIMA và AChE cùng hoạt tính enzyme tăng lên đáng kể, tuy nhiên, tỷ lệ AChE dạng G4 lại giảm. Nghiên cứu chỉ ra rằng PRIMA liên kết với G4 AChE có sự biểu hiện phụ thuộc vào loại sợi cơ. Tương tự, sự biểu hiện của PRIMA, AChE và G4 AChE cũng tăng lên ở tủy sống trong quá trình phát triển. Sau khi cắt bỏ thần kinh, sự biểu hiện của PRIMA, AChE và G4 AChE giảm rõ rệt ở tủy sống và cả ở cơ co nhanh lẫn cơ co chậm.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Abbreviations
• The expression and localization of the proline-rich membrane anchor (PRIMA), an anchoring protein of tetrameric globular form acetylcholinesterase (G4 AChE), were studied at vertebrate neuromuscular junctions.
• Acetylcholinesterase (AChE; EC 3.1.1.7) plays a crucial role in terminating the synaptic transmission by hydrolyzing the neurotransmitter acetylcholine at the neuron-to-neuron synapses in the central nervous system and at the neuromuscular junctions (NMJs) in the peripheral nervous system.
• PRIMA I and PRIMA II isoforms
• Regulation of G4 AChE and PRIMA during muscle development
• Expression of PRIMA-linked G4 AChE in fast-twitch and slow-twitch muscles
• Localization of PRIMA and AChE at NMJs
• Presence of PRIMA-linked G4 AChE in motor neurons
• Innervation regulates the expression of PRIMA-linked G4 AChE in the spinal cord
• Discussion
• Materials and methods
• Production of PRIMA antibody
• DNA construction and transfection
• Western blot analysis
• Immunofluorescence analysis
• Sucrose density gradient analyses
• ELISA for PRIMA-linked G4 AChE
• Real-time PCR analysis
• Sciatic nerve section
• Other assays
• Acknowledgements
• References