Characterization Of An Nº Adenine Methyltransferase From Helicobacter Pylori Strain 26695 Which Methylates Adjacent Adenines On The Same Strand

Characterization of an N6 Adenine Methyltransferase from Helicobacter pylori Strain 26695 Which Methylates Adjacent Adenines on the Same Strand

Tác giả: Ritesh Kumar, Asish K. Mukhopadhyay, Desirazu N. Rao

Lĩnh vực: Department of Biochemistry, Indian Institute of Science, Bangalore, India; Division of Bacteriology, National Institute of Cholera and Enteric Disease, Kolkata, India

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc mô tả và phân tích enzyme N6 adenine methyltransferase (MTase) mang mã gen HP0050 từ chủng Helicobacter pylori 26695. Enzyme này đã được cho biểu hiện, tinh sạch và đặc trưng hóa. Kết quả cho thấy HP0050 nhận diện trình tự 5′-GRRG-3′ và có khả năng methyl hóa cả hai gốc adenine liền kề trên cùng một sợi DNA khi R là A (5′-GAAG-3′). Phân tích động học cho thấy cơ chế methyl hóa là không liên tục (repeated-hit), trong đó HP0050 methyl hóa từng gốc adenine một trên trình tự 5′-GAAG-3′. Đây là báo cáo đầu tiên về N6 adenine DNA methyltransferase có khả năng methyl hóa hai gốc liền kề trên cùng một sợi. Bên cạnh đó, các homolog của HP0050 từ hai chủng lâm sàng khác của H. pylori (PG227 và 128) chỉ methyl hóa trình tự 5′-GAGG-3′, khác với chủng 26695 methyl hóa 5′-GRRG-3′. Enzyme HP0050 được bảo tồn cao, có mặt ở hơn 90% các chủng H. pylori. Việc bất hoạt gen hp0050 ở chủng PG227 dẫn đến sự phát triển kém, cho thấy vai trò quan trọng của nó trong sinh học của H. pylori. Những phát hiện này mở ra hướng nghiên cứu về vai trò của enzyme DNA methyltransferase được bảo tồn này trong các quá trình tế bào của H. pylori.