D-strand perturbation and amyloid propensity in beta-2 microglobulin

D-strand perturbation and amyloid propensity in beta-2 microglobulin

Tác giả: Stavros Azinas, Matteo Colombo, Alberto Barbiroli, Carlo Santambrogio, Sofia Giorgetti, Sara Raimondi, Francesco Bonomi, Rita Grandori, Vittorio Bellotti, Stefano Ricagno and Martino Bolognesi

Lĩnh vực: Science

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc tìm hiểu vai trò của chuỗi β D trong việc bảo vệ protein khỏi sự kết tụ và hình thành amyloid. Beta-2 microglobulin (β2m) là một protein được biết là có khả năng gây amyloid trong cơ thể sống, đặc biệt ở những bệnh nhân suy thận. Các cấu trúc tinh thể của β2m cho thấy một sự thay đổi hình dạng ở chuỗi β D, được cho là có thể ngăn chặn sự kết tụ amyloid. Tuy nhiên, các nghiên cứu khác lại cho thấy sự biến đổi này có thể là do tính linh hoạt nội tại của protein. Để làm rõ vấn đề này, các nhà nghiên cứu đã tạo ra một biến thể β2m (D53P) bằng cách thay thế axit amin Asp53 bằng Proline, nhằm mục đích làm thay đổi cấu trúc chuỗi β D. Các kết quả cho thấy, mặc dù cấu trúc chuỗi β D bị ảnh hưởng bởi đột biến này, nhưng khả năng β2m gây amyloid trong điều kiện thử nghiệm vẫn không thay đổi đáng kể. Điều này cho thấy tính linh hoạt của chuỗi β D có thể đóng vai trò quan trọng trong việc thích ứng với môi trường của sợi amyloid, góp phần vào sự kết tụ của β2m.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Results
• D53P fold stability
• Crystal structure of D53P
• D53P amyloidogenesis in vitro
• Oligomerization of natively-folded D53P
• Discussion
• Experimental procedures
• Mutagenesis
• CD spectroscopy
• Crystallization and structure determination
• Amyloid fibril formation
• MS
• Transmission electron microscopy
• Acknowledgements
• References