Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Nghiên cứu chế tạo phức hệ nano chitosan mang gen mã hóa telomerase reverse transcriptase (hTERT)

Nghiên cứu chế tạo phức hệ nano chitosan mang gen mã hóa telomerase reverse transcriptase (hTERT)

Tác giả: Hoàng Thị Ngà

Lĩnh vực: Sinh học thực nghiệm

Nội dung tài liệu:

Luận văn thạc sĩ khoa học này tập trung vào việc nghiên cứu chế tạo phức hệ nano chitosan mang gen mã hóa telomerase reverse transcriptase (hTERT). Đề tài nhấn mạnh vai trò của hTERT trong điều trị ung thư và tiềm năng của vaccine DNA. Chitosan được đề xuất như một chất mang hiệu quả cho việc chuyển gen, với khả năng liên kết và bảo vệ DNA khỏi sự thủy phân của nuclease. Nghiên cứu bao gồm thiết kế vector tái tổ hợp, tạo hạt nano chitosan và tạo phức hệ nano chitosan-plasmid DNA, cùng với việc đánh giá khả năng mang DNA của hạt nano này.

Mục lục chi tiết:

• Lời cảm ơn
• Danh mục các ký hiệu và các chữ viết tắt
• Danh mục các hình
• Danh mục các bảng
• Mở đầu
• Chương 1: Tổng quan tài liệu
  • 1.1. Giới thiệu về telomerase reverse transcriptase
    • 1.1.1. Giới thiệu chung telomere ở người
    • 1.1.2. Hoạt động telomerase ở người
    • 1.1.3. Tình hình nghiên cứu hTERT
    • 1.1.4. Vacxin DNA và triển vọng tạo vacxin DNA với kháng nguyên hTERT
  • 1.2. Tổng quan về chitosan
    • 1.2.1. Giới thiệu chung chitosan
    • 1.2.2. Ứng dụng của chitosan
    • 1.2.3. Giới thiệu chung về nano chitosan
    • 1.2.4. Chitosan, chất mang dẫn truyền gen
    • 1.2.5. Các phương pháp tạo nano chitosan
• Chương 2: Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
  • 2.1. Vật liệu
    • 2.1.1. Vật liệu và hóa chất
    • 2.1.2. Thiết bị
    • 2.1.3. Môi trường và dung dịch
  • 2.2. Phương pháp nghiên cứu
    • 2.2.1. Phương pháp tích hợp đoạn gen hTERT vào vector pcDNA3.1(+)
    • 2.2.2. Phương pháp cắt bằng enzyme giới hạn
    • 2.2.3. Phương pháp điện di trên gel agarose
    • 2.2.4. Phương pháp thu đoạn DNA từ gel agarose
    • 2.2.5. Phương pháp biến nạp plasmid vào tế bào E. coli
    • 2.2.6. Phương pháp lựa chọn E.coli mang plasmid pcDNA3.1 (+) đã tích hợp gen mã hóa hTERT
    • 2.2.7. Phương pháp tách chiết DNA plasmid từ vi khuẩn
    • 2.2.8. Phương pháp xác định trình tự nucleotide của DNA
    • 2.2.9. Phương pháp tạo hạt nano chitosan
    • 2.2.10. Phương pháp tạo phức hệ nao chitosan/vector mang hTERT
    • 2.2.11. Phương pháp chụp kính hiển vi điện tử quét (Scanning Electron Microscope – SEM)
    • 2.2.12. Phương pháp đo size, phân bố size và thế zeta
    • 2.2.13. Phương pháp xác định hiệu quả đóng gói
• Chương 3: Kết quả và thảo luận
  • 3.1. Thiết kế vector pcDNA3.1(+) mang đoạn gen mã hóa cho epitope của telomerase reverse transcriptase (hTERT)
    • 3.1.1. Tổng hợp đoạn gen hTERT
    • 3.1.2. Chuẩn bị vector pcDNA3.1 mở vòng với hai enzyme BamHI và XbaI
    • 3.1.3. Gắn đoạn gen hTERT vào vector pcDNA3.1(+) và chọn lọc vector pcDNA3.1(+) tái tổ hợp mang đoạn gen hTERT
    • 3.1.4. Xác định trình tự đoạn gen hTERT trong plasmid tái tổ hợp
  • 3.2. Kết quả tạo hạt nano chitosan
    • 3.2.1. Tạo chitosan phân tử lượng thấp từ chitosan phân tử lượng trung bình
    • 3.2.2. Tạo hạt nano chitosan/TPP
  • 3.3. Kết quả tạo phức nano chitosan mang plasmid DNA mã hóa cho hTERT
    • 3.3.1. Tạo hạt nano chitosan mang vector tái tổ hợp pcDNA3.1/hTERT
    • 3.3.2. Đánh giá khả năng mang DNA của hạt nano chitosan
• Kết luận
• Kiến nghị
• Tài liệu tham khảo