Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 141 trang
Dung lượng: 1 MB

Giới thiệu nội dung

Nghiên cứu ảnh hưởng của chất kích kháng lên sự biểu hiện của một số gen tham gia quá trình sinh tổng hợp curcuminoid ở tế bào nghệ đen (Curcuma zedoaria Roscoe)

Tác giả: Trương Thị Phương Lan

Lĩnh vực: Sinh học

Nội dung tài liệu:
Luận án tiến sĩ này tập trung nghiên cứu về cây nghệ đen (Curcuma zedoaria Roscoe), một loài thảo dược có giá trị y học. Nghiên cứu đi sâu vào thành phần hóa học chính của củ nghệ đen, đặc biệt là nhóm chất curcuminoid, và các hoạt tính sinh học quan trọng của chúng như giảm đau, kháng ung thư, bảo vệ gan, kháng viêm và chống loét. Luận án cũng đề cập đến các gen tham gia vào quá trình sinh tổng hợp curcuminoid và vai trò của các chất kích kháng (elicitor) trong việc điều hòa các gen này. Phương pháp nghiên cứu bao gồm nuôi cấy tế bào nghệ đen in vitro, phân lập và phân tích biểu hiện của các gen tổng hợp curcuminoid, cũng như đánh giá ảnh hưởng của các elicitor khác nhau lên quá trình này. Mục tiêu chính là tối ưu hóa sản xuất curcuminoid thông qua việc điều chỉnh biểu hiện gen bằng các elicitor, góp phần nâng cao giá trị dược liệu của cây nghệ đen.

Mục lục chi tiết:

  • Lời cam đoan
  • Bảng chú thích chữ viết tắt
  • Mục lục
  • Danh mục các bảng
  • Danh mục các hình ảnh
  • Mở đầu
    • 1. Tính cấp thiết của đề tài
    • 2. Mục tiêu nghiên cứu
    • 3. Nội dung và phạm vi nghiên cứu
      • Nội dung nghiên cứu
      • Đóng góp mới của luận án
  • Chương 1. Tổng quan tài liệu
    • 1.1. Cây nghệ đen
      • 1.1.1. Đặc điểm thực vật học
      • 1.1.2. Phân bố
      • 1.1.3. Thành phần hóa học chính của củ nghệ đen
        • 1.1.3.1. Tinh dầu
        • 1.1.3.2. Curcuminoid
      • 1.1.4. Công dụng của nghệ đen
        • 1.1.4.1. Hoạt tính giảm đau
        • 1.1.4.2. Hoạt tính kháng ung thư
        • 1.1.4.3. Hoạt tính bảo vệ gan
        • 1.1.4.4. Hoạt tính kháng viêm và chống loét
        • 1.1.4.5. Hoạt tính chống oxy hóa
        • 1.1.4.6. Hoạt tính kháng khuẩn và kháng nấm
        • 1.1.4.7. Các hoạt tính khác
    • 1.3. Elicitor và các ứng dụng
      • 1.3.1. Elicitor
        • 1.3.1.1. Khái niệm
        • 1.3.1.2. Phân loại
        • 1.3.1.3. Cơ chế kích kháng
        • 1.3.1.4. Các yếu tố ảnh hưởng đến sự kích kháng
      • 1.3.2. Ứng dụng của elicitor
        • 1.3.2.1. Elicitor sinh học
        • 1.3.2.2. Elicitor phi sinh học
    • 1.4. Các gen tham gia quá trình sinh tổng hợp curcuminoid
      • 1.4.1. Các con đường sinh tổng hợp curcuminoid
      • 1.4.2. Vai trò của các gen tham gia chu trình tổng hợp curcuminoid
        • 1.4.2.1. Gen mã hóa enzyme diketide-CoA synthase (DCS)
        • 1.4.2.2. Gen mã hóa enzyme curcumin synthase (CURS)
        • 1.4.2.3. Gen mã hóa enzyme Curcuminoid synthase
        • 1.4.2.4. Gen mã hóa enzyme Chalcone synthase
        • 1.4.2.5. Các gen khác
      • 1.4.3. Tổng hợp curcuminoid theo phương thức tái tổ hợp
      • 1.4.4. Cải thiện sự biểu hiện gen bằng xử lý elicitor
  • Chương 2. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu
    • 2.1. Đối tượng nghiên cứu
    • 2.2. Phương pháp nghiên cứu
      • 2.2.1. Nuôi cấy in vitro cây nghệ đen
        • 2.2.1.1. Khử trùng mẫu vật
        • 2.2.1.2. Tái sinh chồi và tạo rễ in vitro
        • 2.2.1.3. Nuôi cấy callus
        • 2.2.1.4. Nuôi cấy tế bào
      • 2.2.2. Phân lập các gen tổng hợp curcuminoid
        • 2.2.2.1. Tách chiết DNA tổng số
        • 2.2.2.2. Khuếch đại PCR
        • 2.2.2.3. Tạo dòng và chú giải gen
        • 2.2.2.4. Xây dựng cây phả hệ
      • 2.2.3. Xác định sự biểu hiện của các gen tổng hợp curcuminoid
        • 2.2.3.1. Xử lý elicitor
        • 2.2.3.2. Phân tích RT-PCR
        • 2.2.3.3. Phân tích HPLC
      • 2.2.4. Xử lý thống kê
  • Chương 3. Kết quả nghiên cứu
    • 3.1. Thiết lập nuôi cấy tế bào
      • 3.1.1. Nhân giống cây nghệ đen in vitro
        • 3.1.1.1. Tái sinh chồi
        • 3.1.1.2. Tạo rễ in vitro
      • 3.1.2. Nuôi cấy callus
        • 3.1.2.1. Ảnh hưởng của 2,4-D và KIN
        • 3.1.2.2. Ảnh hưởng của 2,4-D và NAA
        • 3.1.2.3. Ảnh hưởng của 2,4-D và AgNO3
      • 3.1.3. Nuôi cấy tế bào nghệ đen
    • 3.2. Nhận dạng các gen tổng hợp curcuminoid
      • 3.2.1. Phân lập gen
      • 3.2.2. Phân tích biểu hiện của các gen tổng hợp curcuminoid
    • 3.3. Ảnh hưởng của elicitor lên quá trình sinh tổng hợp curcuminoid
      • 3.3.1. Thăm dò ảnh hưởng của các elicitor lên biểu hiện của các gen tổng hợp curcuminoid
      • 3.3.2. Biểu hiện của gen tổng hợp curcuminoid
      • 3.3.3. Tích lũy curcumin
  • Chương 4. Bàn luận
    • 4.1. Thiết lập nuôi cấy tế bào
      • 4.1.1. Nhân giống cây nghệ đen in vitro
      • 4.1.2. Nuôi cấy callus và tế bào cây nghệ đen
    • 4.2. Phân lập các gen tổng hợp curcuminoid
      • 4.2.1. Phân lập gen tổng hợp curcuminoid
      • 4.2.2. Sự biểu hiện của các gen tổng hợp curcuminoid
    • 4.3. Nghiên cứu ảnh hưởng của elicitor lên sự biểu hiện của các gen tổng hợp curcuminoid
      • 4.3.1. Đặc điểm của các elicitor sử dụng trong nghiên cứu
        • 4.3.1.1. Dịch chiết nấm men
        • 4.3.1.2. Salicylic acid
      • 4.3.2. Ảnh hưởng của elicitor lên sự sinh trưởng của tế bào
      • 4.3.3. Ảnh hưởng của elicitor lên mức độ biểu hiện gen
      • 4.3.4. Ảnh hưởng của các elicitor lên khả năng sản xuất curcumin
  • Kết luận và kiến nghị
    • Kết luận
    • Kiến nghị
  • Danh mục các công bố liên quan đến luận án
  • Tài liệu tham khảo