Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 8 trang
Dung lượng: 193 KB

Giới thiệu nội dung

Recombinant Pronapin Precursor Produced in Pichia pastoris Displays Structural and Immunologic Equivalent Properties to its Mature Product Isolated from Rapeseed

Tác giả: Oscar Palomares, Rafael I. Monsalve, Rosalía Rodríguez and Mayte Villalba

Lĩnh vực: Biochemistry and Molecular Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày về việc sản xuất thành công protein pronapin tái tổ hợp (rproBnIb) trong nấm men Pichia pastoris. Protein này, được mã hóa từ cDNA của tiền chất napin BnIb từ hạt cải dầu (Brassica napus), đã được biểu hiện, tiết ra môi trường ngoại bào và tinh chế. Các phân tích cấu trúc và quang phổ cho thấy rproBnIb được gấp nếp đúng cách và có các đặc tính tương đương với protein trưởng thành tự nhiên. Quan trọng hơn, protein tái tổ hợp này đã được chứng minh là có hoạt tính miễn dịch tương đương, có khả năng liên kết với kháng thể IgE từ huyết thanh của những người bị dị ứng với mù tạt và cải dầu, cũng như các kháng thể đơn dòng đặc hiệu. Kết quả này nhấn mạnh tiềm năng của việc sử dụng hệ thống biểu hiện P. pastoris để sản xuất với số lượng lớn các protein 2S albumin tiền chất, có cấu trúc và chức năng tương đương với các dạng tự nhiên, mở ra hướng đi mới cho nghiên cứu và ứng dụng lâm sàng.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Từ khóa: 2S albumin; cải dầu; dị nguyên; Pichia pastoris; tiền chất BnIb
  • Tài liệu liên quan
  • Phương pháp nghiên cứu:
    • Chủng và plasmid
    • Huyết thanh và kháng thể
    • Phân lập RNA tổng số và tổng hợp cDNA
    • Tổng hợp oligodeoxynucleotide
    • Phân tích trình tự và sao mã dựa trên PCR
    • Biểu hiện quá mức trong P. pastoris và phân lập rproBnIb
    • Tinh chế rproBnIb
    • Phân tích định lượng
    • Phân tích quang phổ
    • Đặc tính miễn dịch
  • Kết quả:
    • Sao mã và xác định trình tự cDNA mã hóa tiền chất napin BnIb
    • Quan hệ cấu trúc giữa dạng tự nhiên và dạng tái tổ hợp của napin BnIb
    • Sự tương đương miễn dịch của rproBnIb và nBnIb
  • Thảo luận
  • Lời cảm ơn
  • Tài liệu tham khảo