Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 14 trang
Dung lượng: 303 KB

Giới thiệu nội dung

Genomic Structure, Expression and Characterization of a STAT5 Homologue from Pufferfish (Tetraodon fluviatilis)

Tác giả: Shu-Chiun Sung, Ting-Jia Fan, Chih-Ming Chou, Jiann-Horng Leu, Ya-Li Hsu, Shui-Tsung Chen, Yueh-Chun Hsieh, and Chang-Jen Huang

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Di truyền học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày việc phân lập và đặc điểm hóa gen STAT5 từ thư viện bộ gen của cá nóc đốm tròn (Tetraodon fluviatilis), được đặt tên là TfSTAT5. Gen TfSTAT5 bao gồm 19 exon với tổng chiều dài 11 kb. Phân tích trình tự axit amin cho thấy TfSTAT5 có độ tương đồng cao nhất với STAT5a và STAT5b của chuột. Các kết quả cũng cho thấy sự bảo tồn cao về cấu trúc bộ gen và trình tự axit amin. Nghiên cứu cũng đã tạo ra protein biến thể STAT5 dạng hỗn hợp để đánh giá đặc tính sinh hóa của TfSTAT5, bao gồm khả năng liên kết với DNA và khả năng hoạt hóa phiên mã. Các thử nghiệm in vitro và in vivo đã được thực hiện để làm sáng tỏ chức năng của TfSTAT5 trong các tế bào cá và động vật có vú.

Mục lục chi tiết:

  • Isolation of the STAT5 gene from a T. fluviatilis genomic library
  • Subcloning, DNA sequence analysis and phylogenetic analysis
  • RACE
  • RNA isolation and RT/PCR
  • Plasmid construction
  • In vitro transcription and translation
  • Cell cultures
  • Preparation of whole cell lysates and nuclear extracts
  • Antibodies, immunoprecipitation and Western blotting
  • EMSA
  • Transactivation assay
  • Results
  • Discussion
  • References