Báo cáo khoa học: DNA-binding and transcription characteristics of three cloned sigma factors from mustard (Sinapis alba L.) suggest overlapping and distinct roles in plastid gene expression

DNA-binding and transcription characteristics of three cloned sigma factors from mustard (Sinapis alba L.) suggest overlapping and distinct roles in plastid gene expression

Tác giả: Anke Homann and Gerhard Link
Lĩnh vực: Plant Cell Physiology and Molecular Biology, University of Bochum, Germany
Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này đã phân lập và nghiên cứu ba yếu tố sigma đã được nhân bản từ cây cải mù tạt (Sinapis alba L.), được đặt tên là SASIG1, SASIG2 và SASIG3. Phân tích chức năng của các yếu tố sigma này, bao gồm cả đột biến vùng promoter và yếu tố, đã tiết lộ rằng cả ba protein tái tổ hợp đều có các đặc tính cơ bản tương tự nhưng cũng cho thấy sự khác biệt trong việc ưu tiên promoter và các yêu cầu đối với các vị trí nucleotide đơn lẻ. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng SASIG3 có một chuỗi tiền chất gợi nhớ đến σ^K của Bacillus subtilis, cho thấy sự phân cắt protein từ một tiền chất không hoạt động có thể liên quan đến việc điều hòa phiên mã ở lạp thể.
Mục lục chi tiết:
– Phân lập protein và phân tích Western blot
– Các đoạn DNA đã nhân bản của DNA lạp thể cải mù tạt
– Biểu hiện và tinh sạch protein tái tổ hợp
– Phân tích dịch chuyển gel DNA
– Đột biến promoter psbA
– Đột biến và biểu hiện của SASIG1-300Q/H và SASIG1-455R/H
– Đặc điểm của các cDNA sigma yếu tố tiềm năng từ S. alba
– Đặc điểm biểu hiện và định vị lạp thể của protein SASIG
– Thuộc tính enzyme giống sigma của các protein SASIG đã nhân bản
– Sở thích của các yếu tố SASIG đối với các promoter lạp thể
– Nghiên cứu đột biến cho thấy các yếu tố xác định trình tự DNA chung và riêng biệt đối với sự gắn kết qua trung gian yếu tố sigma vào promoter psbA
– Các vị trí axit amin của các yếu tố SASIG liên quan đến sự gắn kết promoter
– Thảo luận