Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 8 trang
Dung lượng: 238 KB

Giới thiệu nội dung

Mapping of the epitope of a monoclonal antibody protecting plasminogen activator inhibitor-1 against inactivating agents

Tác giả: Julie S. Bødker, Troels Wind, Jan K. Jensen, Martin Hansen, Katrine E. Pedersen và Peter A. Andreasen
Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Khoa học protein
Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định vị trí của epitope trên kháng thể đơn dòng (monoclonal antibody – Mab-1) có khả năng bảo vệ plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) khỏi các tác nhân gây bất hoạt. PAI-1 thuộc họ serpin, đóng vai trò ức chế các serine proteinase. Bằng phương pháp gây đột biến định hướng vị trí (site-directed mutagenesis) và thử nghiệm bảo vệ kháng thể, các nhà nghiên cứu đã xác định được epitope của Mab-1 nằm trên xoắn alpha C (α-helix C) và vòng nối giữa xoắn alpha I (α-helix I) với dải beta 5A (β-strand 5A). Vị trí này nằm ở phía đối diện với dải beta A (β-sheet A) và cách xa vùng khớp nối linh hoạt (flexible joint region) của PAI-1. Nghiên cứu cũng làm rõ mối liên kết giữa các yếu tố cấu trúc thứ cấp trong serpin, vốn trước đây chưa được biết đến là có tương tác. Kháng thể Mab-1 được chứng minh là có khả năng làm chậm quá trình chuyển đổi sang trạng thái không hoạt động của PAI-1 và bảo vệ PAI-1 khỏi sự bất hoạt bởi các tác nhân hóa học như bis-ANS và XR5118.
Mục lục chi tiết:
– Introduction
– Materials and methods
– PAI-1
– Monoclonal antibodies
– Other proteins and miscellaneous materials
– ELISA
– Measurements of the effects of Mab-1 or Mab-5 and neutralizers on the specific inhibitory activity of PAI-1
– Measurements of the effects of Mab-1 and VN on PAI-1 latency transition and TVASS incorporation rate
– Statistical analysis
– Molecular graphics
– Results
– Epitope mapping
– Mab-1 protection of PAI-1 against bis-ANS and XR5118
– Mab-1 and PAI-1 latency transition and PAI-1 inactivation by an insertion peptide
– Discussion
– References