Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 8 trang
Dung lượng: 171 KB

Giới thiệu nội dung

Hydrolysis of diadenosine polyphosphates by nucleotide pyrophosphatases/phosphodiesterases

Tác giả: Petra Vollmayer, Timothy Clair, James W. Goding, Kimihiko Sano, Jörg Servos, Herbert Zimmermann

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá vai trò của ba thành viên trong họ enzyme ecto-nucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase (NPP1, NPP2, và NPP3) trong việc thủy phân các diadenosine polyphosphates (Ap3A, Ap4A, và Ap5A) cũng như diguanosine polyphosphate (Gp4G). Các thí nghiệm cho thấy cả ba enzyme này đều có khả năng thủy phân các loại diadenosine polyphosphates với tốc độ tương đương. Gp4G cũng được thủy phân bởi NPP1 và NPP2 với tốc độ tương tự Ap4A, nhưng ở tốc độ chậm hơn đối với NPP3. Quá trình thủy phân diễn ra không đối xứng, chủ yếu là phá vỡ liên kết α,β-pyrophosphate. Nghiên cứu cũng xác định các giá trị Michaelis constant (Km) cho Ap3A đối với từng enzyme. Kết quả chỉ ra rằng NPP1, NPP2, và NPP3 là những ứng cử viên enzyme chính cho việc thủy phân các diadenosine polyphosphates ngoại bào trong các mô động vật có xương sống.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu
  • Nuôi cấy tế bào và chuyển gen tế bào
  • Chuẩn bị các phân đoạn màng
  • Đo lường sự thủy phân nucleotide
  • Sự phụ thuộc pH, sự phụ thuộc ion và chất ức chế
  • Phân tích hoạt tính xúc tác trên bề mặt tế bào
  • Kết quả
  • Đặc tính sinh hóa chung của quá trình thủy phân ApnA bởi NPPs
  • Đặc tính và mô hình sản phẩm phản ứng
  • Ảnh hưởng khác nhau của các chất ức chế
  • Thảo luận