Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 12 trang
Dung lượng: 263 KB

Giới thiệu nội dung

Functional Effects of Deleting the Coiled-Coil Motif in Escherichia coli Elongation Factor Ts

Tác giả: Henrik Karring, Asgeir Björnsson, Søren Thirup, Brian F. C. Clark, and Charlotte R. Knudsen

Lĩnh vực: Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá vai trò của motif xoắn kép (coiled-coil motif) trong yếu tố kéo dài Ts (EF-Ts) của vi khuẩn Escherichia coli. Motif này, được xác định trong cấu trúc phức hợp EF-Tu-EF-Ts, chịu trách nhiệm cho sự dimer hóa của EF-Ts trong tinh thể. Bằng cách loại bỏ motif này khỏi gen mã hóa EF-Ts, các nhà nghiên cứu đã tạo ra một chủng đột biến E. coli. Kết quả cho thấy chủng đột biến này có tốc độ tăng trưởng chậm hơn (70-95% so với chủng hoang dã) và nhạy cảm hơn với tình trạng thiếu axit amin. Mặc dù việc loại bỏ motif xoắn kép không làm mất đi khả năng của EF-Ts trong việc kích thích trao đổi nucleotide của EF-Tu, nhưng nó làm giảm đáng kể khả năng cạnh tranh của EF-Ts với các nucleotide guanine để gắn vào EF-Tu. Điều này cho thấy motif xoắn kép đóng vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh hiệu quả trao đổi nucleotide và có thể liên quan đến sự thay đổi cấu trúc của phức hợp EF-Tu-EF-Ts.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và phương pháp
  • Xây dựng vector thay thế gen
  • Loại bỏ motif xoắn kép trong EF-Ts nội sinh của E. coli
  • Đo tốc độ tăng trưởng
  • Kiểm tra kiểu hình trong tình trạng thiếu axit amin
  • Tốc độ tăng trưởng với kirromycin
  • Tương tác trao đổi nucleotide và tổng hợp poly(Phe) định hướng poly(U)
  • Độ ổn định của phức hợp EF-Tu-EF-Ts với nucleotide guanine và kirromycin
  • Thảo luận
  • Kiểu hình của chủng đột biến GRd.tsf trên E. coli
  • So sánh EF-Ts đột biến và EF-Ts từ ty thể bò
  • Vai trò của motif xoắn kép
  • Tài liệu tham khảo