Báo cáo khoa học: Role of the hinge peptide and the intersubunit interface in the swapping of N-termini in dimeric bovine seminal RNase

Role of the hinge peptide and the intersubunit interface in the swapping of N-termini in dimeric bovine seminal RNase

Tác giả: Carmine Ercole, Francesca Avitabile, Pompea Del Vecchio, Orlando Crescenzi, Teodorico Tancredi, Delia Picone

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học cấu trúc

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khảo sát vai trò của peptide gập và giao diện giữa các tiểu đơn vị trong quá trình trao đổi N-đầu cuối ở RNase bán thể bò (BS-RNase) dạng dimer. BS-RNase tồn tại trong dung dịch dưới dạng cân bằng giữa hai cấu trúc 3D khác nhau: MxM (trao đổi N-đầu cuối) và M=M (không trao đổi). Các nhà nghiên cứu đã biểu hiện các protein biến thể bằng cách thay thế hai axit amin quan trọng, Pro19 (trong peptide gập) và Leu28 (tại giao diện giữa các tiểu đơn vị), bằng các gốc tương ứng từ RNase A. Kết quả cho thấy rằng đột biến Pro19 ít ảnh hưởng đến độ ổn định nhiệt của dạng monomer nhưng không làm thay đổi xu hướng trao đổi của dimer. Ngược lại, đột biến Leu28 ảnh hưởng đáng kể đến quá trình dimer hóa và trao đổi, nhưng không ảnh hưởng đến độ ổn định nhiệt của monomer. Những phát hiện này gợi ý rằng các yếu tố cấu trúc điều khiển sự trao đổi N-đầu cuối ở BS-RNase có thể không nằm trong peptide gập, mà đóng vai trò quan trọng ở các gốc tại giao diện giữa các tiểu đơn vị.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Materials and methods
• Construction of mBS mutants
• Recovery of proteins
• Results
• Discussion
• Acknowledgements
• References