Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 231 KB

Giới thiệu nội dung

Cloning and Characterization of Two Distinct Isoforms of Rainbow Trout Heat Shock Factor 1: Evidence for Heterotrimer Formation

Tác giả: Nobuhiko Ojima and Michiaki Yamashita

Lĩnh vực: Sinh học Tế bào, Sinh lý học và Sinh học Phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc làm sáng tỏ cơ chế phân tử điều chỉnh phản ứng sốc nhiệt ở các loài cá nước lạnh. Các nhà khoa học đã phân lập và mô tả hai dạng biến thể (isoform) khác biệt của yếu tố phiên mã sốc nhiệt 1 (HSF1) ở cá hồi vân (rainbow trout), được đặt tên là HSF1a và HSF1b. Kết quả phân tích cho thấy cả hai dạng biến thể này đều sở hữu các yếu tố cấu trúc chung của HSF1, bao gồm miền liên kết DNA, các đoạn lặp lại heptad kỵ nước và tín hiệu định vị nhân. Phân tích Southern blot xác nhận mỗi dạng HSF1 được mã hóa bởi một gen riêng biệt. Các bản tin HSF1a và HSF1b được biểu hiện đồng thời trong các tế bào RTG-2 không bị stress cũng như trong nhiều mô khác nhau của cá hồi vân. Thí nghiệm dịch chuyển điện di (EMSA) chỉ ra rằng mỗi HSF1 dịch mã trong ống nghiệm đều liên kết với yếu tố sốc nhiệt (HSE). Quan trọng hơn, phân tích liên kết ngang hóa học và miễn dịch kết tủa đã chứng minh rằng HSF1a và HSF1b có khả năng hình thành cả các phức hợp đồng phân (homotrimer) và dị phân (heterotrimer). Những phát hiện này cho thấy sự tồn tại của hai dạng biến thể HSF1 riêng biệt ở cá hồi vân, có khả năng hình thành dị phân, gợi ý một cơ chế phân tử độc đáo điều chỉnh phản ứng sốc nhiệt ở các loài cá tứ bội hoặc cá nước lạnh.

Mục lục chi tiết:

  • Cloning of HSF cDNA
  • Sequence determination
  • Isolation of RNA and RT-PCR analysis
  • Genomic Southern blot analysis
  • Expression of two distinct HSF1 genes
  • DNA binding ability of rainbow trout HSF1
  • Oligomeric state of rainbow trout HSF1
  • Discussion
  • References