Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 234 KB

Giới thiệu nội dung

Biophysical Characterization of the Interaction of Limulus Polyphemus Endotoxin-Neutralizing Protein with Lipopolysaccharide

Tác giả: Jörg Andrä, Patrick Garidel, Andreja Majerle, Roman Jerala, Richard Ridge, Erik Paus, Tom Novitsky, Michel H. J. Koch, and Klaus Brandenburg

Lĩnh vực: Sinh hóa, Cấu trúc phân tử, Miễn dịch học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc mô tả đặc tính vật lý-hóa học của tương tác giữa protein trung hòa nội độc tố (ENP) từ sam biển Limulus polyphemus và lipopolysaccharide (LPS) từ vi khuẩn Gram âm. Sử dụng nhiều kỹ thuật vật lý và sinh học, các nhà nghiên cứu đã phân tích sự thay đổi về khả năng gây miễn dịch, điện tích bề mặt, cấu trúc và tính chất chuyển pha của LPS khi có mặt ENP. Kết quả cho thấy ENP có khả năng trung hòa mạnh mẽ khả năng kích thích miễn dịch của LPS, giảm điện tích âm bề mặt và làm cứng chuỗi acyl, đồng thời thay đổi cấu trúc tập hợp của lipid A từ dạng khối sang dạng đa lớp. ENP cũng được chứng minh là có khả năng tự tích hợp vào màng tế bào đích và vận chuyển LPS, tương tự như vai trò của protein liên kết LPS (LBP). Tuy nhiên, ENP làm mất hoạt tính của LPS do khả năng thay đổi cấu trúc tập hợp của nó từ dạng hoạt động sang dạng không hoạt động. Nghiên cứu này cung cấp hiểu biết sâu sắc về cơ chế phân tử mà ENP trung hòa nội độc tố, mở ra tiềm năng cho các ứng dụng y học.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Materials and methods
    • Lipids
    • Preparation of endotoxin aggregates
    • Proteins
    • Determination of endotoxin activity by the chromogenic Limulus test
    • Stimulation of human mononuclear cells by LPS
    • FTIR spectroscopy
    • Zeta potential
    • Differential scanning calorimetry
    • Fluorescence measurements of binding of ANS to ENP
    • Competitive inhibition of ENP binding to biotinylated LPS
    • X-ray diffraction
    • Fluorescence resonance energy transfer (FRET)
  • Results
    • Biological endotoxin-neutralizing activity of ENP
    • Secondary structure of ENP
    • Zeta potential
    • Influence of ENP on the phase transition properties of endotoxin
    • ANS and LPS binding to ENP
    • Lipid A aggregate structure
    • Incorporation into target cell membranes
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References