Báo cáo khoa học: Internalization of the human CRF receptor 1 is independent of classical phosphorylation sites and of b-arrestin 1 recruitment

Internalization of the human CRF receptor 1 is independent of classical phosphorylation sites and of β-arrestin 1 recruitment

Tác giả: Trine N. Rasmussen, Ivana Novak, Søren M. Nielsen

Lĩnh vực: Dược lý học phân tử, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá cơ chế phân tử và tế bào của sự nội hóa thụ thể Corticotropin-releasing factor loại 1 (CRFR1) sau khi kích hoạt bởi chất chủ vận. Các nhà nghiên cứu đã sử dụng kính hiển vi đồng tiêu và định lượng bằng phương pháp ghi nhãn phóng xạ để quan sát và đo lường sự nội hóa thụ thể CRFR1 trong tế bào HEK293. Kết quả cho thấy sự nội hóa CRFR1 không phụ thuộc vào các vị trí phosphoryl hóa cổ điển và sự gắn kết của β-arrestin 1. Điều này chỉ ra rằng các yếu tố khác ngoài phosphoryl hóa và β-arrestin đóng vai trò quan trọng trong quá trình này.

Mục lục chi tiết:

• Giới thiệu
• Thủ tục thực nghiệm
• Cấu trúc cDNA và đột biến
• Nuôi cấy tế bào và chuyển gen
• Xử lý thuốc
• Hóa mô miễn dịch
• Phát hiện EGFP trong tế bào sống
• Kính hiển vi đồng tiêu
• Nội hóa sauvagine được đánh dấu bằng 125I
• Kết quả
• Trực quan hóa sự nội hóa CRFR1 do chất chủ vận gây ra
• Định lượng sự nội hóa CRFR1 do chất chủ vận gây ra
• Thuốc ức chế PKA và PKC không làm giảm sự nội hóa CRFR1 do chất chủ vận gây ra
• Vai trò của các vị trí phosphoryl hóa giả định trong sự nội hóa thụ thể do chất chủ vận gây ra
• β-arrestin 1 được tuyển dụng vào màng plasma sau khi kích hoạt CRFR1
• Vai trò của các vị trí phosphoryl hóa giả định trong việc tuyển dụng β-arrestin1
• Thảo luận
• Lời cảm ơn
• Tài liệu tham khảo