Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 245 KB

Giới thiệu nội dung

Replacement of helix 1′ enhances the lipid binding activity of apoE3 N-terminal domain

Tác giả: Katherine A. Redmond, Conrad Murphy, Vasanthy Narayanaswami, Robert S. Kiss, Paul Hauser, Emmanuel Guigard, Cyril M. Kay, and Robert O. Ryan

Lĩnh vực: Sinh hóa, Khoa học sự sống

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc điều tra vai trò của helix 1′ trong miền N-terminal của apolipoprotein E (apoE-NT) đối với hoạt động liên kết lipid và tương tác với thụ thể lipoprotein mật độ thấp (LDLR). Các nhà khoa học đã tạo ra một biến thể helix-to-turn (HT) của apoE3-NT bằng cách thay thế helix 1′ bằng một chuỗi β-turn. Kết quả cho thấy biến thể HT apoE3-NT thể hiện hoạt động liên kết lipid tăng cường đáng kể so với dạng tự nhiên (wild-type – WT). Biến thể HT cũng cho thấy khả năng tăng cường hòa tan các túi phospholipid và bảo vệ lipoprotein mật độ thấp khỏi sự kết tụ do phospholipase C gây ra. Các phát hiện này gợi ý rằng helix 1′ có vai trò cấu trúc trong việc duy trì tính toàn vẹn của bó xoắn trong trạng thái không có lipid, và việc loại bỏ nó có thể tạo điều kiện cho sự mở rộng của bó xoắn, từ đó tăng cường khả năng liên kết lipid.

Mục lục chi tiết:

  • Keywords
  • Correspondence
  • Abstract
  • Introduction
  • Results
  • Design of helix-to-turn apoE3-NT
  • Bacterial expression and characterization of HT apoE3-NT
  • Stability properties of HT apoE3-NT
  • Fluorescent dye binding
  • LDLR binding activity of the HT apoE3-NT
  • Dimyristoylphosphatidylglycerol vesicle solubilization studies
  • Interaction with lipoproteins
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Lipoproteins, apoE and site directed mutagenesis
  • Analytical procedures
  • Fluorescence spectroscopy
  • Analytical ultracentrifugation
  • LDLR binding assay
  • References