Báo cáo khoa học: Kinetically controlled refolding of a heat-denatured hyperthermostable protein

Kinetically Controlled Refolding of a Heat-Denatured Hyperthermostable Protein

Tên đề tài: Kinetically controlled refolding of a heat-denatured hyperthermostable protein

Tác giả: Sotirios Koutsopoulos, John van der Oost, Willem Norde

Lĩnh vực: Sinh hóa, Hóa lý, Kỹ thuật Y sinh

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khảo sát quá trình biến tính và tái gấp của enzyme endo-β-1,3-glucanase (LamA) từ vi sinh vật ưa nhiệt Pyrococcus furiosus bằng phương pháp nhiệt lượng kế. Kết quả cho thấy enzyme có hai chuyển biến nhiệt ở 109 và 144 °C, tương ứng với sự biến tính và sự gấp hoàn toàn. Quá trình tái gấp của protein biến tính về trạng thái ban đầu chỉ xảy ra khi tốc độ làm nguội rất chậm hoặc khi lưu trữ trong thời gian dài, cho thấy sự gấp lại diễn ra chậm chạp theo thời gian và có thể phục hồi hoạt tính enzyme. Nghiên cứu cũng phân tích các đặc điểm cấu trúc thứ cấp và bậc ba của enzyme trong các trạng thái khác nhau.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Keywords
• Correspondence
• Abbreviations
• Results
• Calorimetry
• Enzymatic activity
• Circular dichroism
• Fluorescence spectroscopy
• Discussion
• Experimental procedures
• Purification of LamA
• Differential scanning calorimetry
• Enzymatic activity tests
• Circular dichroism measurements
• Fluorescence spectroscopy
• Acknowledgements
• References