Báo cáo khoa học: Role of ceramide kinase in peroxisome proliferatoractivated receptor beta-induced cell survival of mouse keratinocytes

Role of ceramide kinase in peroxisome proliferator-activated receptor beta-induced cell survival of mouse keratinocytes

Tác giả: Kiyomi Tsuji, Susumu Mitsutake, Urara Yokose, Masako Sugiura, Takafumi Kohama and Yasuyuki Igarashi

Lĩnh vực: Sinh hóa, Tế bào học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá vai trò của ceramide kinase (CerK) trong việc điều chỉnh sự sống sót của tế bào keratinocyte, đặc biệt là dưới tác động của thụ thể hoạt hóa bởi thụ thể beta (PPARβ). Kết quả cho thấy PPARβ thúc đẩy biểu hiện gen CerK, dẫn đến giảm nồng độ ceramide nội bào và tăng cường khả năng sống sót của tế bào trước tác nhân gây stress. Nghiên cứu cũng xác định mối liên kết trực tiếp giữa PPARβ và gen CerK thông qua một yếu tố phản ứng PPAR (PPRE) trong intron 1 của gen CerK.

Mục lục chi tiết:

• Giới thiệu
• Kết quả
• Gián đoạn hàng rào da ở chuột không lông gây ra biểu hiện mRNA của cả PPARβ và CerK
• Tử vong tế bào do stress bị ức chế bởi điều trị bằng chất chủ vận PPARβ đặc hiệu: L-165,041 (LD)
• Hoạt hóa PPARβ bởi LD gây ra biểu hiện mRNA CerK và tăng hoạt động Cerk ở tế bào SP1
• PPARβ gắn vào PPRE giả định trong CERK và hoạt hóa gen CERK
• Tăng cường sự sống sót của tế bào khi hoạt hóa PPARβ bị suy giảm ở keratinocytes từ chuột không có CerK
• Thảo luận
• Mô hình sơ đồ minh họa vai trò của Cerk trong sự sống sót của tế bào do PPARβ gây ra ở chuột keratinocytes
• Vật liệu và phương pháp
• Vật liệu
• Động vật
• Gián đoạn hàng rào da bằng băng dính
• Thu hoạch và nuôi cấy keratinocytes
• Phân lập RNA tổng số
• RT-PCR
• Đánh giá sự sống sót và chết của tế bào
• Đo lường tổng nồng độ ceramide nội bào
• Định lượng PCR thời gian thực
• Định lượng hoạt động Cerk trong ống nghiệm
• Các xét nghiệm ChIP
• Các xét nghiệm dịch chuyển điện di
• Các cấu trúc plasmid
• Xét nghiệm luciferase và biểu hiện gen
• Thống kê
• Lời cảm ơn
• Tài liệu tham khảo