Luận văn: BƯỚC ĐẦU THỤ TINH TRONG ỐNG NGHIỆM TRÊN CHÓ

Tác giả: TRƯƠNG THỊ HOÀNG DIỆU

Lĩnh vực: CÔNG NGHỆ SINH HỌC

Nội dung tài liệu:

Luận văn này tập trung vào nghiên cứu thụ tinh trong ống nghiệm trên chó. Đề tài khám phá các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình này, bao gồm việc tối ưu hóa nồng độ các chất cần thiết cho nuôi chín trứng và nhuộm trứng, cũng như so sánh hiệu quả của các môi trường nuôi cấy khác nhau. Mục tiêu là từng bước xây dựng quy trình thụ tinh trong ống nghiệm phù hợp cho loài chó, một lĩnh vực còn nhiều thách thức do đặc điểm sinh lý khác biệt của chúng.

Mục lục chi tiết:

• Lời cảm ơn
• Tóm tắt
• Mục lục
• Danh mục các chữ viết tắt
• Danh mục các hình và biểu đồ
• Danh mục các bảng
• Chương 1: MỞ ĐẦU
  • 1.1 Đặt vấn đề
  • 1.2 Mục tiêu
  • 1.3 Yêu cầu
• Chương 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
  • 2.1 Buồng trứng
    • 2.1.1 Vị trí, hình thái
    • 2.1.2 Cấu tạo
    • 2.1.3 Chức năng
  • 2.2 Nang noãn
    • 2.2.1 Đặc điểm hình thái
    • 2.2.2 Sự phát triển của nang noãn
    • 2.2.3 Nội tiết nang tăng trưởng
    • 2.2.4 Sự trưởng thành của nang noãn
      • 2.2.4.1 Trưởng thành nhân
      • 2.2.4.2 Trưởng thành tế bào chất
    • 2.2.5 Sự rụng trứng
  • 2.3 Nuôi chín trứng trong ống nghiệm (In vitro maturation – IVM)
    • 2.3.1 Lịch sử IVM
    • 2.3.2 Môi trường IVM
      • 2.3.2.1 Các loại môi trường IVM
      • 2.3.2.2 Thành phần trong môi trường IVM
    • 2.3.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến kết quả IVM
      • 2.3.3.1 Thời gian
      • 2.3.3.2 Chất lượng noãn và kích thước nang noãn
      • 2.3.3.3 Tuổi và tình trạng sinh dục chó cái
      • 2.3.3.4 Thời gian và nhiệt độ bảo quản mẫu buồng trứng
  • 2.4 Phó tinh hoàn
  • 2.5 Tinh trùng
    • 2.5.1 Nguồn gốc và hình dạng
    • 2.5.2 Quá trình sinh tinh
    • 2.5.3 Cấu tạo
    • 2.5.4 Thành phần
    • 2.5.5 Đặc tính sinh lý
    • 2.5.6 Các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt động của tinh trùng
  • 2.6 Thụ tinh trong ống nghiệm (in vitro fertilization-IVF)
    • 2.6.1 Lịch sử IVF
    • 2.6.2 Cơ chế của sự thụ tinh
    • 2.6.3 Các giai đoạn phát triển của phôi
    • 2.6.4 Vật liệu cho IVF
      • 2.6.4.1 Giao tử
      • 2.6.4.2 Môi trường IVF
    • 2.6.5 Các hệ thống thụ tinh in vitro
    • 2.6.6 Đánh giá kết quả thụ tinh
    • 2.6.7 Các yếu tố ảnh hưởng đến IVF
• Chương 3: VẬT LIỆU PHƯƠNG PHÁP
  • 3.1 Thời gian và địa điểm tiến hành
  • 3.2 Nội dung nghiên cứu
  • 3.3 Vật liệu
    • 3.3.1 Nguồn mẫu
    • 3.3.2 Hóa chất
      • 3.3.2.1 Hóa chất dùng cho trứng
      • 3.3.2.2 Hóa chất dùng cho tinh trùng
      • 3.3.2.3 Hóa chất dùng cho thụ tinh
    • 3.3.3 Dụng cụ – thiết bị
      • 3.3.3.1 Dụng cụ
      • 3.3.3.2 Thiết bị
  • 3.4 Bố trí thí nghiệm
    • 3.4.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát nồng độ ẞ-mercaptoethanol sử dụng để nuôi chín trứng
    • 3.4.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát nồng độ orcein phù hợp cho quy trình nhuộm trứng
    • 3.4.3 Thí nghiệm 3: So sánh hiệu quả thụ tinh trong môi trường Fert-TALP và TYH
  • 3.5 Phương pháp tiến hành
    • 3.5.1 Thu nhận buồng trứng tại lò mổ
    • 3.5.2 Xử lý buồng trứng
    • 3.5.3 Tìm và rửa trứng
    • 3.5.4 Phân loại trứng trước khi nuôi
    • 3.5.5 Nuôi trứng
    • 3.5.6 Thu nhận và đánh giá trứng sau khi nuôi
      • 3.5.6.1 Thu nhận trứng sau khi nuôi
      • 3.5.6.2 Đánh giá trứng sau khi nuôi
    • 3.5.7 Nhuộm trứng
    • 3.5.8 Thu nhận tinh hoàn tại lò mổ
    • 3.5.9 Thu tinh trùng và hoạt hóa tinh trùng
      • 3.5.9.1 Quy trình thu nhận và hoạt hóa tinh trùng
      • 3.5.9.2 Các chỉ tiêu đánh giá tinh trùng trong thụ tinh in vitro
    • 3.5.10 Phương pháp thụ tinh
      • 3.5.10.1 Thụ tinh bằng môi trường Fert-TALP
      • 3.5.10.2 Thụ tinh bằng môi trường TYH
  • 3.6 Xử lý số liệu
• Chương 4: KẾT QUẢ THẢO LUẬN
  • 4.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát hiệu quả nuôi trứng khi bổ sung các nồng độ ẞ-mercaptoethanol
  • 4.2 Thí nghiệm 2 : Khảo sát nồng độ orcein phù hợp cho quy trình nhuộm trứng
  • 4.3 Thí nghiệm 3 : So sánh hiệu quả thụ tinh trong môi trường TYH và Fert – TALP
  • 4.4 Một số kinh nghiệm trong IVF
    • 4.4.1 Lấy mẫu
    • 4.4.2 Thao tác trong phòng thí nghiệm
• Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
  • 5.1 Kết luận
  • 5.2 Đề nghị