Báo cáo Y học: Mydj2 as a potent partner of hsc70 in mammalian cells

Mydj2 as a potent partner of hsc70 in mammalian cells

Tác giả: Petros Bozidis, Ioannis Lazaridis, Gerassimos N. Pagoulatos and Charalampos E. Angelidis

Lĩnh vực: Laboratory of General Biology, Medical School, University of Ioannina, Greece

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này mô tả việc phân lập và đặc trưng hóa một clone cDNA Mydj2 từ tế bào khỉ, cho thấy sự tương đồng với Hsj2 của chuột và là một dạng trực giao của gen DNAJA1. Báo cáo nhấn mạnh sự khác biệt về chiều dài vùng không mã hóa 3′ giữa các mRNA lớn và nhỏ, đồng thời chỉ ra rằng chỉ dạng không farnesyl hóa của dj2 mới có khả năng đi vào nhân tế bào, đặc biệt là sau khi sốc nhiệt. Thông qua các nghiên cứu tương tác protein, kết quả cho thấy dj2 là một đối tác đặc hiệu của hsc70, chứ không phải hsp70, góp phần xây dựng một đơn vị chaperon chức năng.

Mục lục chi tiết:

• Materials and Methods
• CDNA library screening
• Animals
• Cell culture and heat treatment: Western blotting of cell and tissues lysates
• Plasmid constructs
• Expression and purification of histidine-tagged Mydj2: antibody production
• Protein-protein interactions experiments
• Indirect immunofluorence
• RESULTS
• Isolation of a cDNA clone encoding for Mydj2
• Differential expression of large and small dj2 mRNAs
• Large and small dj2 mRNAs are stable and their degradation rates are similar
• Only the nonfarnesylated form of dj2 translocates to the nucleus
• Association of cochaperones Mydj2 with Myhsc70
• DISCUSSION
• ACKNOWLEDGEMENTS
• REFERENCES