Báo cáo khoa học: Unfolding and aggregation during the thermal denaturation of streptokinase

Unfolding and aggregation during the thermal denaturation of streptokinase

Tên đề tài: Unfolding and aggregation during the thermal denaturation of streptokinase

Tác giả: Ana I. Azuaga, Christopher M. Dobson, Pedro L. Mateo, Francisco Conejero-Lara

Lĩnh vực: Hóa lý, Sinh hóa

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này khám phá quá trình biến tính nhiệt của streptokinase (SK) và các đoạn cấu trúc của nó bằng phương pháp nhiệt lượng quét vi sai (DSC). Các thí nghiệm được thực hiện ở các điều kiện pH, nồng độ mẫu và tốc độ gia nhiệt khác nhau để xác định các điều kiện mà sự biến tính nhiệt xảy ra một cách rõ ràng dưới trạng thái cân bằng. Kết quả chỉ ra rằng, dưới các điều kiện nhất định, SK và các đoạn cấu trúc của nó có thể được mô tả bằng ba quá trình chuyển đổi độc lập, tương ứng với ba miền cấu trúc của protein. Tuy nhiên, ở một số điều kiện nhất định (pH thấp hoặc nồng độ mẫu cao), sự biến tính nhiệt của SK và đoạn A của nó đi kèm với sự hình thành các tập hợp protein có khối lượng phân tử lớn. Sự hiện diện của các quá trình tập hợp này làm biến dạng đáng kể các đường cong DSC, khiến chúng trở nên phụ thuộc vào nồng độ và có kiểm soát động học, do đó không thể phân tích bằng các phương pháp giải mã cân bằng tiêu chuẩn. Nghiên cứu cũng đề xuất một mô hình đơn giản để giải thích sự tập hợp tạm thời, có kiểm soát động học này.

Mục lục chi tiết:

• Abstract
• Introduction
• Materials and Methods
• Results
• Thermal unfolding of SK under equilibrium
• The effect of protein concentration and scan rate on the DSC curves
• Thermal denaturation of isolated SK domain A
• A simple model for transient, kinetically controlled aggregation
• Discussion
• Conclusions
• Acknowledgements
• References
• Appendix