Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 8 trang
Dung lượng: 165 KB

Giới thiệu nội dung

Reconstructing The Replication Complex Of AcMNPV

Tác giả: Kathleen L. Hefferon and Lois K. Miller

Lĩnh vực: Vi sinh học, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định cấu trúc và chức năng của phức hợp sao chép virus AcMNPV. Các yếu tố biểu hiện muộn (LEFs) liên quan đến quá trình sao chép DNA của virus đã được gắn thẻ FLAG và HA để nghiên cứu biểu hiện, hoạt động chức năng và vị trí dưới tế bào. Kết quả cho thấy hầu hết các LEFs đều nằm trong nhân, ngoại trừ P143 và P35. Nghiên cứu cũng điều tra sự tương tác giữa các LEFs bằng các phương pháp lai ghép nấm men hai mặt và đồng kết tủa, từ đó đề xuất một mô hình về sự lắp ráp phức hợp sao chép AcMNPV.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Materials and Methods
  • Expression plasmid construction
  • Transfections and CAT assays
  • Subcellular localization and immunofluorescence studies
  • Coprecipitation and immunoblotting
  • Yeast two-hybrid cloning
  • β-Galactosidase assays
  • Results
  • Expression and characterization of HA- and FLAG-tagged LEFs
  • Interactions between replication LEFs determined from the yeast two-hybrid system
  • Interactions between LEFs determined from coprecipitation studies
  • Interactions between multiple LEFs: reconstruction of the DNA replication complex
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References