Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 215 KB

Giới thiệu nội dung

Stimulation-dependent recruitment of cytosolic phospholipase A2-α to EA.hy.926 endothelial cell membranes leads to calcium-independent association

Tác giả: Seema Grewal, Jennifer Smith, Sreenivasan Ponnambalam and John Walker

Lĩnh vực: Biochemistry and Molecular Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc khám phá cơ chế liên kết của enzyme phospholipase A2-α (cPLA2-α) với màng tế bào nội mô EA.hy.926 sau khi được kích thích. Các thí nghiệm phân lập tế bào và miễn dịch huỳnh quang cho thấy cPLA2-α di chuyển đến màng tế bào nội mạc sau khi kích thích bởi histamine, thrombin hoặc ionophore A23187. Điều đáng chú ý là một phần đáng kể của cPLA2-α vẫn liên kết với màng tế bào ngay cả khi không có canxi, cho thấy một cơ chế liên kết mới không phụ thuộc vào canxi. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng miền C2 của cPLA2-α có thể tham gia vào việc liên kết không phụ thuộc canxi này với màng tế bào nội mô đã được kích thích, gợi ý vai trò của các protein phụ trợ trong việc điều hòa cPLA2-α.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Experimental procedures
  • Materials
  • Cell culture
  • Subcellular fractionation
  • Preparation of cell cytoskeletons
  • Temperature-induced phase separation of Triton X-114
  • C2 domain binding assays
  • Results
  • CPLA2-α relocates to intracellular membranes following an elevation in cytosolic calcium concentration
  • EGTA-resistant membrane binding is not dependent on a change in hydrophobicity or the cytoskeletal association of cPLA2-α
  • The C2 domain of cPLA2-α demonstrates calcium-independent binding to membranes
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References