Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 158 KB

Giới thiệu nội dung

Detergent-resistant membranes are platforms for actinoporin pore-forming activity on intact cells

Tác giả: Jorge Alegre-Cebollada, Ignacio Rodríguez-Crespo, José G. Gavilanes and Álvaro Martínez del Pozo

Lĩnh vực: Departamento de Bioquímica, Facultad de Química, Universidad Complutense, Madrid, Spain

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khảo sát hoạt tính tạo lỗ của sticholysin II (StnII), một độc tố tạo lỗ từ hải quỳ Stichodactyla helianthus, trên tế bào COS-7. Kết quả cho thấy StnII làm tăng tính thấm của tế bào đối với propidium cation theo cách phụ thuộc liều lượng và thời gian. Hoạt tính này bị suy giảm khi tiền xử lý tế bào bằng cyclodextrin. Việc phân lập màng tế bào kháng detergent (DRMs) cho thấy StnII cùng định vị với caveolin-1 trong các phân đoạn tương ứng với các miền giống raft. Sự tương tác này dường như chỉ phụ thuộc vào lipid và có thể xảy ra ngay cả khi không có protein liên quan đến màng khác. StnII liên kết với các túi lipid giống raft đã ức chế khả năng làm tăng tính thấm của tế bào. Những phát hiện này gợi ý rằng StnII thúc đẩy sự hình thành lỗ trên tế bào COS-7 thông qua tương tác với các miền màng hoạt động như các raft tế bào.

Mục lục chi tiết:

  • Kết quả
  • Stnll permeabilizes COS-7 plasma membranes
  • Stnll enrichment in DRM fractions
  • Stnll and caveolin-1 cellular colocalization
  • Artificial raft-like lipid vesicles inhibit pore-forming activity
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Materials and cell culture media
  • Protein purification
  • Preparation of the phospholipid vesicles
  • Permeabilization assays
  • DRM isolation
  • Confocal immunofluorescence microscopy
  • Assay of phospholipid vesicle binding
  • Acknowledgements
  • References